尋常型銀屑病中T-bet和GATA-3表達的研究.pdf

1、銀屑病是一常見的免疫性、炎癥性皮膚病，呈慢性經(jīng)過，反復(fù)發(fā)生，多數(shù)患者終生受累。目前的治療手段有限，治療效果不盡人意。因此，該病給患者帶來生理和心理上的極大痛苦。雖然銀屑病至今病因不明，但目前公認(rèn)該病是在一定的遺傳背景基礎(chǔ)上發(fā)生T細胞介導(dǎo)的免疫紊亂所致，其中Th1分化優(yōu)勢及Th1型細胞因子在介導(dǎo)銀屑病的發(fā)生和發(fā)展中起著重要的作用。 目的： 近年來，已經(jīng)證實了T細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子T-bet和GATA-3是決定Th1和Th2極

2、性分化的關(guān)鍵因素。T-bet是T-box家族Tbr1亞家族成員，在Th1細胞分化中起著核心作用，它不僅控制Th1細胞特征性細胞因子IFN-γ的表達，而且抑制Th2細胞特征性細胞因子IL-4的產(chǎn)生，還能誘導(dǎo)已定向的Th2細胞向相反的Th1細胞分化，因而被確認(rèn)為目前所知唯一的Th1特異性轉(zhuǎn)錄因子。GATA-3則促進。Th2細胞特征性細胞因子(IL-4等)的產(chǎn)生，是Th2特異性轉(zhuǎn)錄因子。 由于T-bet和GATA-3在Th細胞分化中的

3、重要作用，人們對它們與Th1和Th2漂移性疾病的關(guān)系產(chǎn)生了濃厚的興趣。國內(nèi)外的學(xué)者也為此做了大量的工作，對于T-bet、GATA-3與哮喘、炎癥性腸病、異位性皮炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等疾病的關(guān)系都有了相應(yīng)的研究。最近已有國內(nèi)的學(xué)者對銀屑病患者外周血PBMCT-bet和GATA-3的表達水平進行了研究，但至今國內(nèi)外均未見關(guān)于銀屑病患者組織和外周血T-bet／GATA-3表達情況的研究報道。 本研究旨在以特異性轉(zhuǎn)錄因子T-bet、GATA

4、-3、Th1／Th2平衡為核心，比較尋常型銀屑病患者與正常人外周血中IFN-γ和IL-4的水平以及外周血單一核細胞T-bet和GATA-3的基因表達,同時還比較患者皮損和正常人皮膚組織T-bet和GATA-3的表達,初步闡明T-bet和GATA-3在銀屑病發(fā)病機制中的意義. 對象和方法銀屑病患者外周血標(biāo)本來源為2006年9月至2007年3月住院及門診就診的進行期尋常型銀屑病病人，抽血前1月內(nèi)無系統(tǒng)用藥史，除外其他免疫相關(guān)性疾病如腫瘤，肝

5、炎，糖尿病等。健康對照組均取自正常體檢人群，經(jīng)血常規(guī)、大小便常規(guī)和肝腎功能等檢測均顯示正常，無重大疾病史。銀屑病患者皮膚組織標(biāo)本來源為2006年9月至2007年3月住院及門診就診的進行期尋常型銀屑病病人，收取標(biāo)本前1月內(nèi)無系統(tǒng)用藥史，所取皮損為兩周內(nèi)新發(fā)，未予局部藥物治療。正常對照組均取自外科手術(shù)病人正常腹部皮膚組織。 方法： 采用ELISA法檢測銀屑病患者與正常人外周血中IFN-γ和IL-4的水平，RT-PCR法比較銀

6、屑病患者與正常人外周血T-bet和GATA-3的基因表達，同時用免疫組化的方法比較患者皮損和正常人皮膚T-bet和GATA-3的表達。 結(jié)果： 1.尋常型銀屑病患者血清IFN-7和IL-4濃度21例尋常型銀屑病患者血清IFN-γ濃度為16.20±2.OOpg／ml，20例正常對照組血清IFN-γ濃度為14.78±1.96pg／ml，兩者差異具有顯著性(P<0.05)；21例尋常型銀屑病患者血清IL-4濃度為22.12+6

7、.70pg／ml，20例正常對照組血清IL-4濃度為26.30±+5.91pg／ml，兩者差異也具有顯著性(P<0.05)。 2.尋常型銀屑病患者外周血單一核細胞T-bet和GATA-3的表達21例尋常型銀屑病患者外周血單一核細胞T-bet的表達顯著高于正常對照組(P

8、屑病患者血清IFN-γ濃度與外周血單一核細胞T-bet表達量的相關(guān)系數(shù)為0.803(PO．33)，兩者之間表現(xiàn)的相關(guān)性較為明顯。 3.2 T-bet表達水平與IL-4濃度的相關(guān)性分析尋常型銀屑病患者血清IL-4濃度與外周血單一核細胞T-bet表達量的相關(guān)系數(shù)為-0.072(P>O．05

9、)，兩者之間無顯著相關(guān)性。 3.3 GATA-3表達水平與IFN-γ濃度的相關(guān)性分析尋常型銀屑病患者血清IFN-γ濃度與外周血單一核細胞GATA-3表達量的相關(guān)系數(shù)為-O．5244(P>0.05)，兩者之間無顯著相關(guān)性。 3.4 GATA-3表達水平與IL-4濃度的相關(guān)性分析尋常型銀屑病患者血清IL-4濃度與外周血單一核細胞GATA-3表達量的相關(guān)系數(shù)為0.452(P>0.05)，兩者之間無顯著相關(guān)性。 4.尋常

10、型銀屑病患者皮損與正常人皮膚中CD4和CD8表達水平的比較 (1)CD4在銀屑病患者皮損中主要表達于淋巴細胞胞膜上，主要是皮損組織真皮乳頭層浸潤的淋巴細胞以及幾乎所有移入表皮棘層的淋巴細胞呈陽性表達；在正常人皮膚中幾乎未見有CD4的表達。兩者比較有顯著性差異(P

11、表達。兩者比較無顯著性差異(P>O．05)。 5.尋常型銀屑病患者皮損與正常人皮膚中T-bet和GATA-3表達水平的比較 (1)T-bet在銀屑病患者皮損中主要表達于淋巴細胞胞核內(nèi)，大多數(shù)陽性的淋巴細胞位于真皮乳頭層，在移入表皮棘層的淋巴細胞胞核內(nèi)也有部分表達，在真皮乳頭部擴張的血管周圍浸潤的大部分淋巴細胞中表達為陽性，而且染色相對較深；T-bet在正常人皮膚中幾乎未見表達。兩者比較有顯著性差異(P

12、過對同一患者兩張切片的粗略比較發(fā)現(xiàn)CD4表達較強的皮損組織T-bet的表達也相對較強，但陽性淋巴細胞浸潤的范圍及部位卻不太一致。 (2)GATA-3只有在少數(shù)銀屑病患者皮損組織的淋巴細胞胞核中有散在表達，且表達較弱：GATA-3也只有在少數(shù)正常皮膚組織的淋巴細胞胞核中有散在表達，且表達較弱。兩者比較無顯著性差異(P>O．05)。 結(jié)論： 1.尋常型銀屑病患者血清IFN-γ濃度高于正常對照組，IL-4濃度低于正常對

13、照組，進一步證實銀屑病存在Th1分化優(yōu)勢。 2.尋常型銀屑病患者外周血單一核細胞T-bet的表達顯著高于正常對照組，而且T-bet表達水平與血清IFN-γ濃度呈顯著正相關(guān)；尋常型銀屑病患者外周血單一核細胞GATA-3的表達顯著低于正常對照組，但與血清IFN-γ濃度無顯著相關(guān)性。提示T-bet可能是通過與IFN-γ形成的正反饋調(diào)節(jié)環(huán)在尋常型銀屑病的發(fā)生和發(fā)展中起到重要的促進作用，而GATA-3對進行期尋常型銀屑病則起到負性調(diào)節(jié)的作