大鼠腹主動脈移植硬化的細(xì)胞學(xué)機(jī)制及其靶向干預(yù)研究.pdf

1、目的：血管加速硬化是影響移植物術(shù)后長期存活的關(guān)鍵問題之一，其發(fā)病機(jī)理尚不完全清楚，因而缺乏有效防治措施。本研究基于前期研究發(fā)現(xiàn)，采用強(qiáng)化缺血再灌注損傷(Ischemiareperfusioninjury，IRI)的大鼠腹主動脈原位移植模型，進(jìn)一步探討雙源修復(fù)的規(guī)律和受者干細(xì)胞及趨化因子—基質(zhì)衍生因子-1(Stromalcellderivedfactor-1，SDF-1)在此過程中介導(dǎo)的修復(fù)重構(gòu)機(jī)制。 方法：建立雄性Wistar大

2、鼠至雄性SD大鼠的腹主動脈原位移植模型，據(jù)移植動脈缺血時間分為延長冷缺血組(延長冷保存時間=48小時)，對照組(冷保存時間＜1小時)；基質(zhì)衍生因子-1單克隆抗體干預(yù)組(冷保存時間＜1小時，術(shù)后予基質(zhì)衍生因子-1單克隆抗體干預(yù)組8μg/kg/d)，采集3組術(shù)后7天、14天、21天、28天、60天和90天移植動脈，HE染色觀察不同時間點移植動脈內(nèi)膜增殖程度并測量內(nèi)膜厚度；免疫組織化學(xué)方法檢測不同時間點移植血管SDF-1及VEGF的表達(dá)，RT

3、-PCR檢測VEGF及移植血管干細(xì)胞的標(biāo)記CXCR4的表達(dá)。 結(jié)果：1.延長冷缺血組與對照組比較，術(shù)后14天前兩組無明顯差別；術(shù)后14～60天，延長冷缺血組內(nèi)膜厚度＞對照組，60天后內(nèi)膜厚度＜對照組。 2.SDF-1單克隆抗體干預(yù)組術(shù)后內(nèi)膜增殖維持在較低水平。 3.內(nèi)膜增殖的主要部分為平滑肌樣細(xì)胞，而非中膜增殖的平滑肌細(xì)胞(Smoothmusclecells,SMCs)，中膜厚度無變化。 4.移植動脈SD

4、F-1的表達(dá)量與內(nèi)膜厚度正相關(guān)，SDF-1可動員干細(xì)胞參與移植動脈術(shù)后的修復(fù)、重構(gòu)。 5.阻斷SDF-1對干細(xì)胞的趨化可明顯延緩內(nèi)膜增生速度。 6.VEGF可能不參與嚴(yán)重?fù)p傷后血管內(nèi)膜增殖；也不是介導(dǎo)受者細(xì)胞(干細(xì)胞)參與內(nèi)膜修復(fù)增殖的關(guān)鍵信號分子。 結(jié)論：1.適當(dāng)延長冷缺血時間可促進(jìn)受者細(xì)胞早期參與血管修復(fù)重構(gòu)，加速內(nèi)膜增殖，減輕晚期血管硬化程度。 2.SDF-1是介導(dǎo)參與移植血管內(nèi)膜增殖的主要信號分子