丹參聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細胞靜脈移植對心肌梗死兔炎癥反應影響的實驗研究.pdf

1、目的：
　　 對比研究經(jīng)靜脈移植骨髓間充質(zhì)干細胞（MSCs）、丹參注射液靜脈注射及骨髓間充質(zhì)干細胞移植聯(lián)合中藥丹參靜脈注射對心肌梗死兔的血清TNF-α、CRP、P-selection的影響，推測丹參注射液對骨髓間充質(zhì)干細胞移植微環(huán)境的改善作用，以及三種干預方式對心功能的影響。
　　 材料與方法：
　　 1、材料
　　 （1）實驗動物的選擇與分組動物采用日本大耳白兔，體重在2-3kg，2-3個月齡，雌雄不限

2、，購自于遼寧中醫(yī)藥大學實驗動物中心。將70只日本大耳白兔隨機分為正常A組（10只），造模組60只，根據(jù)復制模型成功率（預實驗的最低造模成功率70％計算），將造模組心肌梗死模型復制成功后，隨機分為模型對B照組（10只）、靜脈0天注射干細胞C組（10只）、靜脈0天注射中藥D組（10只），靜脈0天注射干細胞聯(lián)合中藥E組（10只）。組間體重差異無顯著性（2.4±0.3kg、2.5±0.2kg、2.3±0.3kg、2.5±0.3kg、2.4±0．

3、2kg，p>0．05）。
　　 2、方法
　　 方法：取兔骨髓間充質(zhì)干細胞進行體外培養(yǎng)、增殖和標記，同時將已建立心肌梗死模型的日本大耳白兔隨機分為4組，模型對照組（B組）、靜脈0天注射干細胞組（C組）、靜脈0天注射丹參組（D組），靜脈0天注射丹參聯(lián)合干細胞組（E組），開胸結(jié)扎冠狀動脈左室支的方法建立急性心肌梗死模型，造膜即刻經(jīng)靜脈注射已經(jīng)分離、培養(yǎng)、擴增、標記后的MSCs懸液，靜脈注射中藥組經(jīng)靜脈注射丹參注射液。移植后2

4、4小時檢測外周血血清肌酸激酶同功酶（CK-MB），移植后24小時及5周檢測外周血中TNF、CRP、P選擇素含量，對梗死區(qū)心肌組織進行Brdu免疫組化染色以觀察靜脈移植MSCs是否遷移至梗死區(qū)。移植后4周測定心功能。
　　 結(jié)果：
　　 1．干細胞靜脈注射組和干細胞聯(lián)合丹參靜脈注射組梗死區(qū)組織免疫組化brdu染色陽性；
　　 2.24小時血清炎癥因子，TNF-α、CRP、P選擇素各組間無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。

5、五周炎癥因子：TNF-α，與模型組比較，靜脈注射骨髓間充質(zhì)干細胞組明顯降低有統(tǒng)計學差異（P<0.05）；靜脈注射丹參注射液組明顯降低有統(tǒng)計學差異（P<0.01）；靜脈注射骨髓間充質(zhì)干細胞聯(lián)合中藥組明顯降低有統(tǒng)計學差異（P<0.05）；骨髓間充質(zhì)干細胞組、丹參注射液組、骨髓間充質(zhì)干細胞聯(lián)合中藥組三組間無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。CRP，模型組、骨髓間充質(zhì)干細胞組、丹參注射液組、骨髓間充質(zhì)干細胞聯(lián)合中藥組各組間無統(tǒng)計學差異（P>0.05）

6、。P-選擇素，與模型組比較，靜脈注射骨髓間充質(zhì)干細胞組明顯降低有統(tǒng)計學差（P<0.05）；靜脈注射丹參注射液組明顯降低有統(tǒng)計學差異（P<0.01）；靜脈注射骨髓間充質(zhì)干細胞聯(lián)合中藥組明顯降低有統(tǒng)計學差異（P<0.01）；骨髓間充質(zhì)干細胞組、丹參注射液組、骨髓間充質(zhì)干細胞聯(lián)合中藥組三組間無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。
　　 3．心功能檢測顯示：與正常組比較，模型組明顯降低有統(tǒng)計學差異（P<0.01），靜脈注射骨髓間充質(zhì)干細胞組明顯

7、降低，有統(tǒng)計學差異（P<0.05）；靜脈注射丹參注射液組明顯降低，有統(tǒng)計學差異（P<0.05）；靜脈注射骨髓間充質(zhì)干細胞聯(lián)合中藥組雖有降低，但無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。
　　 與模型組比較，骨髓間充質(zhì)干細胞聯(lián)合中藥組明顯升高有統(tǒng)計學差異（P<0.05）；骨髓間充質(zhì)干細胞組、丹參注射液組雖有降低但無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。
　　 靜脈注射骨髓間充質(zhì)干細胞組、靜脈注射丹參注射液組、靜脈注射丹參注射液組、三組間無統(tǒng)計學

8、差異（P>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1．骨髓間充質(zhì)干細胞靜脈注射可以遷移至心梗區(qū)及周圍區(qū)。
　　 2．骨髓間充質(zhì)干細胞和丹參注射液靜脈注射均能降低血清TNF-β、P-選擇素水平，但丹參注射液不能促進骨髓間充質(zhì)干細胞下調(diào)炎癥因子的作用。實驗未發(fā)現(xiàn)骨髓間充質(zhì)干細胞和丹參注射液血清CRP有調(diào)節(jié)作用。
　　 3．骨髓間充質(zhì)干細胞移植和丹參注射液靜脈注射可以改善心肌梗死兔心功能。丹參注射液靜脈注射聯(lián)合骨髓間