非小細(xì)胞肺癌患者CD14+HLA-DR--low髓系抑制性細(xì)胞特點(diǎn)及與肺癌進(jìn)展相關(guān)性研究.pdf

1、目的:觀察非小細(xì)胞肺癌患者外周血中CD14+HLA-DR-/low細(xì)胞頻率、絕對值、表型及功能特點(diǎn)。同時(shí)探討NSCLC患者外周血中CD14+HLA-DR-/low細(xì)胞變化與腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、化療療效及無疾病進(jìn)展生存之間的關(guān)系。試圖建立預(yù)測NSCLC化療療效的細(xì)胞學(xué)指標(biāo),并為臨床制定化療聯(lián)合免疫治療方案提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:采集健康對照35例,非小細(xì)胞肺癌89例的外周血,流式細(xì)胞儀檢測外周血CD14+HLA-DR-/low細(xì)胞頻率和

2、絕對值,并分析其常見表面分子的表達(dá)情況,并根據(jù)臨床分期和病理類型對各組間進(jìn)行比較。用CFSE及細(xì)胞內(nèi)因子染色方法檢測NSCLC患者外周血CD14+HLA-DR-/low細(xì)胞對CD4+與CD8+T細(xì)胞的抑制作用。應(yīng)用Real-time PCR技術(shù)和DCFH-DA熒光探針篩選可能的抑制功能相關(guān)分子,并通過相關(guān)阻斷劑實(shí)驗(yàn)明確CD14+HLA-DR-/low細(xì)胞抑制機(jī)制。并利用CD14+HLA-DR-/low細(xì)胞變化特點(diǎn),分析它們與化療近期療效

3、的關(guān)系。多組實(shí)驗(yàn)結(jié)果間用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn),對兩組獨(dú)立數(shù)據(jù)間進(jìn)行Mann-Whitney U檢驗(yàn),對于配對數(shù)據(jù)之間的檢測使用Wilcoxon matched-pairs t檢驗(yàn)。對于數(shù)據(jù)之間的相關(guān)性分析使用Spearman rank相關(guān)性檢驗(yàn)?；颊呱媲€的繪制采用Kaplan-Meier方法,不同組之間的比較采用Log-rank檢驗(yàn)。
　　結(jié)果:
　　1.用流式細(xì)胞儀檢測非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者外周

4、血CD14+HLA-DR-/low細(xì)胞頻率和計(jì)數(shù)相對于健康對照均明顯升高;
　　2.NSCLC患者CD14+HLA-DR-/low細(xì)胞與肺癌的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及化療近期療效密切相關(guān);
　　3.相對于經(jīng)典的CD14+HLA-DR+細(xì)胞,NSCLC患者CD14+HLA-DR-/low細(xì)胞仍具有部分單核細(xì)胞系的表型特征,但低表達(dá)CD16與CD86分子,并喪失同種異基因刺激能力;
　　4.NSCLC患者CD14+HLA-DR-/low

5、細(xì)胞能夠抑制CD4+與CD8+T細(xì)胞的激活增殖及分泌細(xì)胞因子IFN-γ的能力,且發(fā)揮抑制作用需要與靶細(xì)胞近距離接觸;
　　5.NSCLC患者CD14+HLA-DR-/low細(xì)胞高表達(dá)NADPH氧化酶亞基gp91phox和ROS,通過抑制ROS能夠有效恢復(fù)CD4+與CD8+T細(xì)胞的功能。
　　結(jié)論:NSCLC患者外周血CD14+HLA-DR-/low細(xì)胞通過產(chǎn)生ROS來抑制機(jī)體的免疫系統(tǒng),調(diào)節(jié)針對腫瘤的免疫反應(yīng),可能參與非小細(xì)