普羅布考對(duì)血管性癡呆大鼠海馬組織SOD、MDA影響的實(shí)驗(yàn)性研究.pdf

1、目的:血管性癡呆(vascular dementia，VD)是腦血管疾病的常見(jiàn)并發(fā)癥，它是由一系列腦血管因素導(dǎo)致腦組織損害引起的以認(rèn)知功能障礙為特征的癡呆綜合癥，不僅給患者帶來(lái)長(zhǎng)期痛苦，嚴(yán)重影響其生活質(zhì)量，而且給家庭、社會(huì)造成沉重負(fù)擔(dān)。近一個(gè)世紀(jì)，由于人類(lèi)平均年齡的逐步增加，導(dǎo)致癡呆人群的不斷增加，特別是血管性癡呆，在歐洲被認(rèn)為是繼阿爾茨海默病后導(dǎo)致癡呆的第二位因素，在亞洲可能占有的地位更為重要。因此對(duì)血管性癡呆的研究也就顯得特別重要。

2、近年來(lái)，自由基損傷與血管性癡呆之間的關(guān)系逐漸成為人們研究的熱點(diǎn)問(wèn)題。組織中丙二醛(Maleic Dialdehyde，MDA)是脂質(zhì)過(guò)氧化物的主要代謝產(chǎn)物，超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase，SOD)活力的高低間接反映了機(jī)體清除氧自由基的能力。本研究旨在了解血管性癡呆大鼠海馬組織中SOD和MDA的變化，以進(jìn)一步探討VD與氧化損傷的關(guān)系，并進(jìn)一步探討普羅布考對(duì)VD模型大鼠智能改善的情況及海馬區(qū)SOD和MDA的影響，為

3、臨床使用普羅布考治療VD提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:選取健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，將大鼠隨機(jī)分為空白模型組、假手術(shù)組、普羅布考組，每組12只。對(duì)大鼠采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久性結(jié)扎的方法，造成慢性腦灌注不足所致VD模型。動(dòng)物模型的篩選標(biāo)準(zhǔn):術(shù)后7天在各組大鼠進(jìn)行Morris水迷宮試驗(yàn)訓(xùn)練1天，以假手術(shù)組大鼠平均逃避潛伏期的均值為參考值，計(jì)算手術(shù)組大鼠平均逃避潛伏期與參考值之差占平均逃避潛伏期的比例，該值＞20％

4、定為癡呆鼠。普羅布考組給予普羅布考500mg/kg/d灌胃，假手術(shù)組與空白模型組給予等劑量羧甲基纖維素鈉灌胃。灌胃8周后，開(kāi)始為期5天的Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)，前4天為定位航行試驗(yàn)，記錄平均逃避潛伏期。第5天進(jìn)行空間搜索試驗(yàn)，記錄大鼠穿越原平臺(tái)次數(shù)。水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，制作大腦海馬HE切片，采用光鏡觀察各組大鼠海馬CA1區(qū)的形態(tài)學(xué)變化;取海馬組織制成10％勻漿，采用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定SOD活力，硫代巴比妥酸(Thibabituric Ac

5、id, TBA)法測(cè)MDA含量。通過(guò)觀察大鼠行為學(xué)、海馬組織形態(tài)學(xué)以及檢測(cè)海馬組織中SOD、MDA的表達(dá)，評(píng)價(jià)普羅布考對(duì)VD大鼠的作用效果。
　　 結(jié)果:
　　 1、一般狀況觀察
　　 早期觀察，手術(shù)后大鼠不能進(jìn)食，運(yùn)動(dòng)減少，反應(yīng)遲鈍，但無(wú)肢體癱瘓。前6天體重逐漸減少，每天降低59左右，第7天大鼠體重開(kāi)始恢復(fù)。上述觀察結(jié)果與文獻(xiàn)所描述的模型后表現(xiàn)大致相符，說(shuō)明復(fù)制的模型成功。
　　 2、行為學(xué)測(cè)定

6、　　 用Morris水迷宮觀察VD大鼠學(xué)習(xí)記憶情況，以大鼠逃避潛伏期代表學(xué)習(xí)能力，逃避潛伏期越短，學(xué)習(xí)能力越強(qiáng)。水迷宮訓(xùn)練的第1天起，空白模型組比假手術(shù)組的逃避潛伏期明顯延長(zhǎng)(P＜0.01)，普羅布考組與空白模型組比較，逃避潛伏期明顯縮短(P＜0.01)。第5天空白模型組比假手術(shù)組的穿越平臺(tái)次數(shù)顯著減少(P＜0.01)。普羅布考組與空白模型組比較，穿越平臺(tái)次數(shù)明顯增加(P＜0.01）。各組大鼠隨著訓(xùn)練時(shí)間的推移，訓(xùn)練次數(shù)的增多，尋找平

7、臺(tái)的方式在不斷變化，尋找平臺(tái)的時(shí)間都在縮短，說(shuō)明學(xué)習(xí)鍛煉可以增強(qiáng)記憶能力。
　　 3、腦組織SOD活力和MDA含量的測(cè)定
　　 空白模型組與假手術(shù)組相比，空白模型組SOD活性明顯降低，差異具有顯著性(P＜0.01)，MDA含量明顯增加(P＜0.01）;普羅布考組與空白模型組比較，普羅布考組SOD活性明顯增加(P＜0.01），MDA含量明顯降低(P＜0.01)。
　　 4、海馬神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
　　 假手

8、術(shù)組海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞層結(jié)構(gòu)緊密，神經(jīng)細(xì)胞核完整，胞漿豐富?？瞻啄Ｐ徒M海馬CA1區(qū)的細(xì)胞排列紊亂，神經(jīng)細(xì)胞數(shù)明顯減少，許多細(xì)胞變得不完整，有的形成碎片，基質(zhì)疏松及微空泡形成。普羅布考組海馬CA1區(qū)的形狀與正常接近，大腦海馬區(qū)細(xì)胞排列緊密，層次豐富，細(xì)胞數(shù)明顯多于空白模型組，神經(jīng)細(xì)胞完整，胞漿豐富，可見(jiàn)少量變性細(xì)胞。
　　 結(jié)論:
　　 1、大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久性結(jié)扎可以建立血管性癡呆模型。
　　 2、VD大鼠M