沈陽(yáng)地區(qū)家庭聚集性HBV感染者基因型分布及其與病毒載量及肝組織病理的關(guān)系.pdf

1、目的：本研究預(yù)采用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)結(jié)合熒光探針技術(shù)對(duì)60例有家庭聚集性的HBV感染者進(jìn)行HBV基因分型，并探討基因型分布及其與病毒載量及肝組織病理的關(guān)系。 方法：1.本實(shí)驗(yàn)60例有家庭聚集性的HBV感染者血清均取自2006年12月到2008年12月在中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院感染科住院的沈陽(yáng)地區(qū)患者，所有血清均為HBsAg和HBV DNA陽(yáng)性(HBV DNA水平≥103copies/ml為陽(yáng)性)。其中臨床診斷慢性無(wú)

2、癥狀HBV攜帶者(ASC)16例，慢性乙型肝炎(CHB)患者32例，代償期肝硬化(LC)患者12例，年齡10～55歲，平均年齡32歲，均進(jìn)行HBV基因型檢測(cè)，HBV DNA定量檢測(cè)，肝組織病理檢測(cè)。研究對(duì)象入選標(biāo)準(zhǔn)：1)家庭聚集性慢性HBV感染者診斷標(biāo)準(zhǔn)：HBV感染者凡符合其母親或(和)父親HBV標(biāo)志物陽(yáng)性及同胞中大于或等于1人為HBV標(biāo)志物陽(yáng)性者，均可為家庭聚集性慢性HBV感染。2)臨床診斷：依據(jù)2000年擬定的病毒性肝炎防治方案。2

3、.HBV基因分型：采用PCR技術(shù)結(jié)合熒光探針技術(shù)，對(duì)乙型肝炎病毒基因進(jìn)行熒光PCR分型檢測(cè)，試劑盒由杭州博康生物科技有限公司生產(chǎn)，該試劑盒只能檢測(cè)乙肝病毒基因B、C基因型，儀器使用ABI7500多色熒光PCR儀及相應(yīng)軟件。3.HBV DNA定量檢測(cè)：熒光定量PCR檢測(cè)，試劑盒由深圳匹基生物制品有限公司生產(chǎn)，檢測(cè)靈敏度為103copies/ml，儀器使用Lanegene FQ-PCR熒光定量擴(kuò)增儀。4.肝組織病理檢測(cè)：60例患者肝組織取材

4、均在超聲引導(dǎo)下進(jìn)行，取肝組織2cm，常規(guī)4％甲醛固定，石蠟包埋，標(biāo)本切片為4μm，均做HE、MASSON及網(wǎng)狀纖維特殊染色，提出炎癥分級(jí)(G)/纖維化分期(S)診斷。其G/S診斷參照2000年病毒性肝炎防治方案。5.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：在醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件spss15.0上進(jìn)行X2檢驗(yàn)，以P<0.05確定差異有無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果：1、HBV基因型分布：60例患者中，B型14例，占23.3％，C型40例，占66.7％，無(wú)法分型6例，占10％。

5、其中，在16例臨床診斷的ASC中，B型3例，占18.75％，C型12例，占75％；在32例CHB患者中，B型11例，占34.375％，C型17例，占53.125％；在12例LC患者中，C型11例，占91.7％。2、HBV基因型與病毒載量的關(guān)系：將HBV DNA載量分為兩組，其中<106copies/ml為低載量組，>106copies/ml為高載量組。在臨床診斷的16例ASC中，HBV DNA均為高載量組；在32例CHB患者中，HBV

6、DNA有9例為低載量組，23例為高載量組；在12例LC患者中，6例為低載量組，6例為高載量組。B、c基因型均以高載量為主，經(jīng)X2檢驗(yàn)后，P值>0.05，兩型之間病毒載量并無(wú)明顯差異。3、HBV基因型與肝組織病理的關(guān)系：B型肝組織病理?yè)p害較輕，≤G1者13例(92.9％)，≤S1者12例(85.7％)；C型肝組織病理?yè)p害較重，≥G2者21例(52.5％)，≥S2者18例(45％)。在12例LC患者中，幾乎均為C型(91.7％)，提示C型與

7、嚴(yán)重肝病有關(guān)。在11例B型CHB患者中，≤G1者10例(90.9％)，≤S1者9例(81.8％)；在17例C型CHB患者中，≤G1者7例(41.2％)，≤S1者8例(47.1％)；≥G2者10例(58.8％)，≥S2者9例(52.9％)；經(jīng)X2檢驗(yàn)后，X2=76.6，P<0.05，提示C型患者的肝細(xì)胞炎性損傷程度及肝組織纖維化程度均高于B型患者，即C型肝組織損傷較重。16例ASC中，肝組織病理無(wú)明顯變化者3例，有不同程度的肝損害的13例