DNA氧化性損傷的非酶性快速修復(fù)可能存在于細(xì)胞中.pdf_第1頁(yè)
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1、本文研究了兩種天然多酚類化合物毛蕊花甙(VER)和迷迭香酸(RA)在細(xì)胞體系中的修復(fù)作用,證明細(xì)胞中也可能存在DNA非酶性快速修復(fù)。用H2O2處理中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO)及其突變株高表達(dá)DNA修復(fù)蛋白XRCC1的AA8細(xì)胞株來(lái)產(chǎn)生DNA的氧化性損傷。結(jié)果顯示高表達(dá)XRCC1的細(xì)胞(AA8)存活率高于正常表達(dá)XRCC1的細(xì)胞(CHO)。已知細(xì)胞中DNA氧化性損傷主要通過(guò)堿基切除修復(fù)(BER)來(lái)完成,許多修復(fù)酶參與了這一修復(fù)過(guò)程。采用甲氧

2、胺(MX),3-氨基苯甲酰胺(3AB)或煙酰胺(NIC)來(lái)抑制BER中的修復(fù)酶。結(jié)果顯示兩種細(xì)胞經(jīng)H2O2處理后,DNA氧化性損傷均可增高2-5倍,RA或VER與細(xì)胞溫育后可使DNA氧化性損傷明顯降低。為了排除這種降低是多酚類清除活性氧所致的可能性,將培養(yǎng)液中的RA或VER在加入H2O2之前就徹底清洗掉,僅在細(xì)胞內(nèi)保留低濃度多酚。我室從多酚類化合物、DNA和H2O2三者濃度和反應(yīng)速率常數(shù)計(jì)算出競(jìng)爭(zhēng)系數(shù),該系數(shù)表明多酚類化合物首先修復(fù)DN

3、A氧化性損傷,而不是首先清除活性氧。實(shí)測(cè)結(jié)果也表明細(xì)胞中ROS在實(shí)驗(yàn)全過(guò)程一直維持在高水平,ROS并沒(méi)有被多酚類清除。所以當(dāng)修復(fù)酶被抑制后,DNA氧化性損傷的下降不是ROS被清除所致,而應(yīng)是被多酚類非酶性修復(fù)所致。H2O2可以誘導(dǎo)線粒體膜電位的下降,BER抑制劑進(jìn)一步加劇下降,而RA或者VER能夠緩解這種下降趨勢(shì)。前人已發(fā)現(xiàn)線粒體膜電位為維持DNA損傷的修復(fù)能力所必需,表明RA和VER有助于維持修復(fù)能力。結(jié)論:非酶性快速修復(fù)不僅存在于化

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