鐵皮石斛雜交選育及原胚高效誘導(dǎo)技術(shù)研究.pdf

1、本研究以天柱山鐵皮石斛與齊云山鐵皮石斛作為種質(zhì)資源，建立了鐵皮石斛雜交選育體系，經(jīng)過人工雜交育種、初選、復(fù)選和決選，篩選出了性狀較為優(yōu)良的8個(gè)新品種，并通過比較新品種與親本在生態(tài)特征、生物量大小、生物學(xué)特性和品質(zhì)性狀四個(gè)方面的不同，進(jìn)行雜交選育技術(shù)的研究;以雜交F1代果莢為材料，建立一套鐵皮石斛原胚高效誘導(dǎo)體系，通過原胚誘導(dǎo)階段、原球莖增殖階段、不定芽生根壯苗階段最佳培養(yǎng)基的篩選及最佳煉苗基質(zhì)的篩選進(jìn)行鐵皮石斛原胚高效誘導(dǎo)技術(shù)研究。研究

2、的主要內(nèi)容如下:
　　(1)通過對(duì)幾種不同品種鐵皮石斛進(jìn)行優(yōu)良性狀的比較，確定天柱山鐵皮石斛和齊云山鐵皮石斛為新品種選優(yōu)的種質(zhì)資源。
　　(2)天柱山鐵皮石斛作為父本、齊云山鐵皮石斛作為母本，進(jìn)行雜交育種，獲取F1代果莢，以其為原材料建立鐵皮石斛原胚高效誘導(dǎo)體系。
　　(3)通過比較9組滅菌試驗(yàn)得出，最佳的滅菌方法為先將外植體用洗滌劑清洗，流水沖洗20min，用75％的酒精消毒30s，無菌水沖洗4次，再用0.1％升汞消

3、毒10min，無菌水沖洗5次。
　　(4)原胚誘導(dǎo)階段，最適原胚高效誘導(dǎo)的基本培養(yǎng)基為CHDD基本培養(yǎng)基，萌芽率高達(dá)83.12％，萌發(fā)時(shí)間為28.33 d;最適原胚高效誘導(dǎo)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度配比為1.0 mg/L NAA+1.5 mg/L BA+1.0 mg/L2，4-D，發(fā)芽率高達(dá)90.60％，萌發(fā)時(shí)間為26.67d;最適原胚高效誘導(dǎo)的有機(jī)添加物的濃度配比為6 g/L魚粉+15 g/L椰子汁+40 g/L香蕉泥，發(fā)芽率達(dá)95.6

4、7％，萌發(fā)時(shí)間僅26.33d。
　　(5)原球莖增殖階段，最適原球莖增殖的基本培養(yǎng)基為JHDD基本培養(yǎng)基，增殖倍數(shù)為5.47，幼葉葉片數(shù)為3.33片;最適原球莖增殖的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度配比為0.3 mg/L IBA+0.6mg/L KT+1.0 mg/L2，4-D，增殖倍數(shù)達(dá)6.19，幼葉葉片數(shù)為6.33片;最適原球莖增殖的有機(jī)添加物濃度配比為20 g/L玉米汁+15 g/L椰子汁+40 g/L香蕉泥，增殖倍數(shù)達(dá)7.00，幼葉葉片

5、數(shù)為9.00片。
　　(6)不定芽生根壯苗階段，最適生根壯苗的基本培養(yǎng)基為SHDD基本培養(yǎng)基，平均苗高為7.55cm，平均根數(shù)為6.33條;最適生根壯苗的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度配比為1.0 mg/L NAA+0.2 mg/L IAA+1.5 mg/L IBA，平均苗高為8.04 cm，根數(shù)為8.67根;最適生根壯苗的有機(jī)添加物濃度配比為20g/L西紅柿+15g/L馬鈴薯+30g/L香蕉泥，平均苗高為8.04cm，根數(shù)為8.67條。

6、r>　　(7)煉苗階段，最適合鐵皮石斛培養(yǎng)的煉苗方法是先用水苔綁住苗根，再移栽入椰糠基質(zhì)，成活率達(dá)98％，且長(zhǎng)勢(shì)非常好，平均株高為6.70cm，莖粗為0.90cm，根數(shù)達(dá)11條，葉片寬且厚，顏色亮綠。
　　(8)通過初選、復(fù)選和決選，最終確定8種性狀最為優(yōu)良的鐵皮石斛為選優(yōu)新品種。
　　(9)為了衡量新品種與親本的生態(tài)特征，將親本與新品種進(jìn)行植物學(xué)特性、開花特性和果莢特性三方面的比較。在植物學(xué)特性方面，發(fā)現(xiàn)新品種的株高平均為

7、6.70cm，而其莖粗為0.903m，分別高于其父本和母本0.11cm和0.43cm，葉片數(shù)量高于其父本和母本，為11片，葉片較大，為5.17 cm×1.72cm，根數(shù)較多，平均為11條，并且主根較粗，為0.32cm，新品種表現(xiàn)出一種株型好且繁殖系數(shù)高的態(tài)勢(shì);在開花特性方面，發(fā)現(xiàn)在花柄長(zhǎng)度上，新品種平均較其父本和母本分別提高了0.98cm和0.25cm，在花莖上，新品種較其父本和母本分別提高了1.15cm和0.37cm，其觀賞特性和繁殖

8、特性較其父本和母本更加優(yōu)越;在果莢特性方面，新品種平均果莢長(zhǎng)為3.47 cm，果莢的最大直徑為0.87 cm，單株果莢數(shù)最多可達(dá)到16個(gè)，而其坐果率也較其父本和母本分別提高了14.10％和6.30％。
　　(10)為了衡量新品種與親本的生物量大小，分別計(jì)算出三個(gè)品種的單株干重占鮮重比，結(jié)果表明，品種干重與鮮重的平均比重為11.03％，較其親本分別高出了1.39％和2.23％。說明在生物量方面，新品種性狀明顯優(yōu)于親本。
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9、11)為了衡量新品種與親本的生物學(xué)特性，將親本與新品種進(jìn)行物候期和抗熱性兩方面的比較。結(jié)果表明，在物候期方面，新品種在到達(dá)展葉期、開花期、結(jié)果期時(shí)較親本均有提前，且開花期和結(jié)果期都比親本要長(zhǎng)，這一性狀的改良，為鐵皮石斛的快速繁殖提供了基礎(chǔ);在抗熱性方面，新品種能夠抵抗的溫度最高，達(dá)35℃，且恢復(fù)時(shí)間最快，恢復(fù)率最高。
　　(12)為了衡量新品種與親本的品質(zhì)性狀，將新品種與親本進(jìn)行倒伏率、蟲害率和葉片黃化率三個(gè)方面的比較，結(jié)果表明，