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1、目的:
《中國(guó)藥典》規(guī)定紫蘇葉藥材薄層鑒定用紫蘇醛作對(duì)照品,但是全國(guó)紫蘇葉資源調(diào)查研究表明,我國(guó)現(xiàn)有的紫蘇葉藥材多是紫蘇酮型種質(zhì),紫蘇醛含量極低,并且紫蘇酮有一定毒副作用,這一狀況嚴(yán)重影響紫蘇葉藥材的安全性和有效性。為了優(yōu)選紫蘇醛型的紫蘇種質(zhì)資源,并進(jìn)行生產(chǎn)推廣,需要對(duì)紫蘇醛型的種質(zhì)進(jìn)行篩選及對(duì)紫蘇紫蘇醛含量的變化規(guī)律進(jìn)行研究,以此為紫蘇醛型紫蘇優(yōu)良品種選育奠定基礎(chǔ),并為紫蘇種植和紫蘇葉采收等生產(chǎn)實(shí)踐提供一些指導(dǎo)意見。
2、 方法和結(jié)果:
紫蘇果實(shí)形態(tài)研究和紫蘇醛型種質(zhì)的初步篩選:通過(guò)觀察和比較紫蘇果實(shí)的5個(gè)主要形態(tài)特征,分別是:果實(shí)顏色、脊紋、硬度、平均粒徑和百粒重,然后對(duì)55份紫蘇果實(shí)形態(tài)進(jìn)行觀察和統(tǒng)計(jì),經(jīng)過(guò)聚類分析,紫蘇果實(shí)按照形態(tài)可分為6類,對(duì)每一類種植后觀察所屬亞種類型和揮發(fā)油化學(xué)型測(cè)定,發(fā)現(xiàn)紫蘇醛型紫蘇較少,僅出現(xiàn)在只含有黃棕色或深褐色的小粒(平均粒徑≤1.5mm,百粒重≤0.16g)、脊紋低、硬度硬特征的紫蘇果實(shí)中,但是該類果實(shí)中
3、屬于紫蘇醛型的種質(zhì)比例為30-50%,均為回回蘇變種。
HPLC快速測(cè)定紫蘇醛含量方法的建立:參考《日本藥局方》測(cè)定紫蘇葉中紫蘇醛含量的方法,建立快速測(cè)定紫蘇葉和紫蘇果實(shí)中紫蘇醛的方法,并對(duì)定量方法進(jìn)行方法學(xué)考察。
通過(guò)果實(shí)形態(tài)和果實(shí)中紫蘇醛的檢測(cè)判定紫蘇醛型紫蘇種質(zhì)的驗(yàn)證研究:對(duì)后續(xù)獲得的紫蘇果實(shí),按照前期建立的形態(tài)篩選方法,進(jìn)行驗(yàn)證,證明果實(shí)為脊紋低、硬度硬、黃棕色或深褐色小粒(平均粒徑≤1.5mm,百粒重≤0.
4、16g)的紫蘇更可能是紫蘇醛型,再結(jié)合果實(shí)紫蘇醛存在與否的快速檢測(cè),又可以提高紫蘇醛型種質(zhì)的判定率,可達(dá)到80%以上。
紫蘇醛種質(zhì)評(píng)價(jià)和紫蘇醛含量變化規(guī)律研究:將9個(gè)紫蘇醛型種質(zhì)種植在北京藥植所試驗(yàn)田,在不同的生長(zhǎng)發(fā)育期,兼顧一天的不同采摘時(shí)間以及植株的不同采摘部位,采集紫蘇葉,測(cè)定紫蘇醛含量。不同種質(zhì)紫蘇醛含量差異較大;采樣日期在9月21日前后,暨開花期前的含量達(dá)到峰值;不同采摘部位含量:頂部葉>中部葉>底部葉,在落葉期趨于
5、相近;不同采摘時(shí)間對(duì)于含量的影響不大。
結(jié)論:
本論文建立了利用紫蘇果實(shí)形態(tài)和果實(shí)紫蘇醛快速檢測(cè)相結(jié)合的方法對(duì)紫蘇醛型種質(zhì)進(jìn)行篩選,具有可行性與可靠性。通過(guò)對(duì)多個(gè)紫蘇醛型種質(zhì)種植過(guò)程中大量紫蘇醛含量數(shù)據(jù)的分析,表明影響紫蘇醛含量的主要因素是種質(zhì),其次是采樣日期和采摘部位,一天內(nèi)的不同采摘時(shí)間影響不大;大多數(shù)種質(zhì)在抽穗前或者抽穗開花早期紫蘇醛含量最高,表明開花有可能影響紫蘇醛含量的積累,且頂部葉的含量要高于其它部位。甄
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