Toll樣受體9基因多態(tài)性與兒童哮喘的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：TLRs是一類先天性免疫模式識別受體，它具有連接先天性免疫和適應(yīng)免疫的橋梁作用。TLR9的激活可誘導(dǎo)適應(yīng)性免疫的Th1轉(zhuǎn)化作用，其在哮喘發(fā)病中可能有重要作用。外國有研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)其基因多態(tài)性可能與哮喘或濕疹有關(guān)，但也有研究得出相反的結(jié)論，提示TLR9多態(tài)性存在種族差異。本研究對中國兒童TLR9的單核苷酸多態(tài)性進(jìn)行研究，探討其與哮喘之間的相關(guān)性：（1）檢測中國漢族兒童TLR9的單核苷酸多態(tài)性的分布情況，并分析其與哮喘易感性之間的關(guān)系；

2、（2）分析TLR9單核苷酸多態(tài)性與哮喘嚴(yán)重程度之間的關(guān)系；（3）分析TLR9單核苷酸多態(tài)性與血漿細(xì)胞因子水平的相關(guān)性；（4）分析TLR9單核苷酸多態(tài)性與血清TIgE、D1IgE和特應(yīng)質(zhì)之間的相關(guān)性。 方法：2007年4月至2008年11月收集的303例哮喘患兒（哮喘組）和139名健康對照兒童（對照組）的TLR9基因-1486和-1237位點的單核苷酸多態(tài)性采用DNA直接測序法進(jìn)行測定分析。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定哮喘

3、組血漿中IFN-γ、IL-12和IL-4的水平；采用化學(xué)發(fā)光法測定哮喘組血清總IgE水平，采用酶免疫熒光法檢測血清D1IgE。 結(jié)果：（1）哮喘組和對照組在擴(kuò)增的548bp長度的序列中，發(fā)現(xiàn)-1486位點存在多態(tài)性，基因型有TT、TC和CC三種類型，以TC型為主。-1237位點野生基因型為TT，該位點突變僅在哮喘組（1/303）和對照組（1/139）中各發(fā)現(xiàn)1例，基因型為TC。哮喘組TT、TC和CC三種基因型的頻率分別是40．3

4、%、48．2%和11．6%，等位基因T的頻率為64．4%，C為35．6%；對照組三種基因型的頻率分別是41．7%、43．9%和14．4%，等位基因T和C的頻率分別為63．7%和36．3%。兩組基因型及等位基因構(gòu)成比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（x2分別為1．0427和0．0391，P均>0．05）。 （2）哮喘組-1486位點三種基因型的哮喘嚴(yán)重程度構(gòu)成比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（x2=14．187，P=0．007），但是TC和TT基因型比較差異無

5、統(tǒng)計學(xué)意義（x2=1．066，P=0．587），即TC和TT基因型兒童“中、重度持續(xù)”比例較低，CC基因型哮喘患兒“中、重度持續(xù)”比例較高。 （3）哮喘組血漿IFN-γ在三種基因型患兒間的差別有統(tǒng)計學(xué)意義（x2=12．288，P=0．002），哮喘組CC基因型的血漿IFN-γ水平低于TC和TT基因型患兒；IL-12在三種基因型患兒間的差別無統(tǒng)計學(xué)意義（x2=1．801，P=0．406）；IL-4在三種基因型患兒間的差別有統(tǒng)計學(xué)意

6、義（x2=15．656，P=0．000），TC基因型的血漿IL-4最低，CC基因型的次之。 （4）哮喘組-1486位點三種基因型的特應(yīng)質(zhì)情況（x2=2．130，P=0．345）、1gTIgE（F=0．385，P=0．681）和D1IgE（x2=1．960，P=0．375）水平差別無統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論：（1）中國漢族兒童存在TLR9基因-1486位點的單核苷酸多態(tài)性，該位點的單核苷酸多態(tài)性與哮喘易感性無關(guān)。中國漢族兒童不存

7、在-1237位點的單核苷酸多態(tài)性。檢測以上兩個位點基因型對于判斷某兒童對哮喘是否易感無參考價值。 （2）TLR9基因-1486位點的單核苷酸多態(tài)性與患兒哮喘嚴(yán)重程度相關(guān)，含有CC基因型的兒童患“中、重度持續(xù)哮喘”的比例較高，而含有TC和TT基因型的兒童較低。哮喘患兒測定-1486位點的基因型對判斷哮喘的預(yù)后具有重要的意義。 （3）TLR9基因-1486位點的單核苷酸多態(tài)性與哮喘組血漿中IFN-γ和IL-4的水平相關(guān)，與I