維生素D及相關(guān)基因多態(tài)性和兒童哮喘的關(guān)系.pdf

1、本文分析了維生素D及相關(guān)基因多態(tài)性和兒童哮喘的關(guān)系。本研究分為兩個(gè)部分：
　　第一部分：探討血清維生素D水平與兒童哮喘的關(guān)系。
　　目的：探討血清維生素D和兒童哮喘發(fā)病的關(guān)系；探討血清維生素D和哮喘嚴(yán)重度的相關(guān)性。
　　方法：研究對(duì)象為哮喘患者100例，正常對(duì)照100例。進(jìn)行哮喘患者的診斷,哮喘的分期，哮喘嚴(yán)重度的確定，肺功能的測(cè)定(包括FEV1絕對(duì)值,FVC和FEV1/FVC等指標(biāo)),食物頻次調(diào)查、相關(guān)資料的收集（年

2、齡、性別、體重等）、血樣的收集。用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定兩組血清25-OH-D濃度，流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞免疫功能。統(tǒng)計(jì)學(xué):一般信息及描述性數(shù)據(jù)釆用t檢驗(yàn)及卡方檢驗(yàn);組間比較釆用多個(gè)樣本均數(shù)比較的方差分析或非參秩和Mann-Whitney U檢驗(yàn)。采用卡方檢驗(yàn)分析哮喘兒童維生素D水平與哮喘發(fā)病的關(guān)系與各免疫指標(biāo)之間的相關(guān)性。
　　結(jié)果：⑴哮喘組25-OH-D3水平20.84±6.80ng/ml,對(duì)照組25-OH-D3水平28.83±6.6

3、9ng/ ml,哮喘組25-OH-D3水平明顯低于對(duì)照組(t=44.875，P<0.001)。⑵春夏秋冬四季中哮喘組及對(duì)照組的25-OH-D3水平均有差別（P<0.05）。⑶哮喘輕度持續(xù)組和中度持續(xù)組25-OH-D3水平差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=72.155，P>0.05),中度持續(xù)組與重度持續(xù)組差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=43.770，P>0.05)。而輕度持續(xù)組與重度持續(xù)組差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=62.000，P<0.05)。⑷血清25-

4、OH-D3濃度與哮喘組肺功能相關(guān)，與對(duì)照組肺功能無(wú)相關(guān)性。⑸血清25-OH-D3濃度和哮喘組CD4、CD4/CD8相關(guān)，而在對(duì)照組中無(wú)相關(guān)性。
　　結(jié)論：①哮喘組血清維生素D水平比對(duì)照組降低，可能和兒童哮喘發(fā)病相關(guān);②血清維生素D水平和哮喘嚴(yán)重度呈負(fù)相關(guān)；
　　第二部分：探討相關(guān)基因單核苷酸多態(tài)性與兒童哮喘的關(guān)系。
　　目的：探討CYP27B1、GC、 VDR基因有關(guān)位點(diǎn)單核苷酸多態(tài)性與兒童哮喘的相關(guān)性；探討CYP27

5、B1、GC、 VDR基因有關(guān)位點(diǎn)單核苷酸多態(tài)性與兒童哮喘嚴(yán)重度的相關(guān)性。
　　方法：研究對(duì)象為哮喘患者100例，正常對(duì)照100例。病例組和對(duì)照組患者均留取靜脈血冰凍保存。其后統(tǒng)一進(jìn)行基因組 DNA的提取。上述基因單核苷酸多態(tài)性的基因型和等位基因頻率在 MassARRAY系統(tǒng)中利用Sequenom技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，研究與兒童哮喘之間的關(guān)系，并進(jìn)一步分析兒童哮喘嚴(yán)重度與單核苷酸多態(tài)性的相關(guān)性。統(tǒng)計(jì)學(xué)：每個(gè)位點(diǎn)SNP基因型頻率與等位基因頻率

6、采用卡方檢驗(yàn)，以檢測(cè)在兩組中的差異是否具有顯著性；采用多個(gè)獨(dú)立樣本非參數(shù)檢驗(yàn)檢測(cè)哮喘組位點(diǎn)基因型與病情嚴(yán)重度及肺功能是否存在相關(guān)性。
　　結(jié)果：⑴VDR基因位點(diǎn)rs1544410基因型GA在哮喘組與對(duì)照組的分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.22,P<0.05)。⑵哮喘組CYP27B1基因位點(diǎn)rsl0877012基因型GT與重度哮喘顯著相關(guān)（χ2=3.47，P<0.05)。⑶GC基因位點(diǎn)rs2282679三種基因型AA、CC、AC在哮