灰樹花發(fā)酵工藝優(yōu)化及其發(fā)酵液成分的初步研究.pdf

1、灰樹花又稱為林雞或舞茸，隸屬于擔(dān)子菌亞門、非褶菌目、多孔菌科；它是一種食用真菌，并且在亞洲市場(chǎng)上它又作為一種藥用真菌出售。因?yàn)榛覙浠ㄗ訉?shí)體香味沁脾，味道鮮美，其灰樹花多糖更具有抗腫瘤、抗病毒等作用，所以它在消費(fèi)者中深受好評(píng)。本文主要篩選產(chǎn)灰樹花多糖高產(chǎn)菌株Grifola frondosa，研究Grifola frondosa搖瓶發(fā)酵工藝條件并對(duì)其發(fā)酵液成分進(jìn)行定性分析。
　　 灰樹花菌株在PDA平板培養(yǎng)基25℃培養(yǎng)，菌絲的平均萌

2、發(fā)時(shí)間為7d，菌絲顏色較純白，菌絲生長(zhǎng)較致密。3號(hào)灰樹花菌株在PDA綜合平板培養(yǎng)基上萌發(fā)時(shí)間和平均平板培養(yǎng)時(shí)間最短，分別為4d和15.3d。在搖瓶培養(yǎng)中與1號(hào)和2號(hào)灰樹花菌株相比較，其菌球密度分別高7％和12％，菌絲體干重每升分別高2.06g和3.44g，粗多糖含量每升分別高0.11g和0.27g。
　　 在搖瓶發(fā)酵工藝研究上，分別對(duì)種子和發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行選擇和優(yōu)化，得到適合的培養(yǎng)基配方；在此基礎(chǔ)上，系統(tǒng)考察了發(fā)酵培養(yǎng)條件，確定種

3、子培養(yǎng)采用兩級(jí)活化方式，最適的種子培養(yǎng)時(shí)間為108h，接種量為10％(v/v)，確定發(fā)酵培養(yǎng)基初始pH6.0，培養(yǎng)溫度為25℃，搖床轉(zhuǎn)速為140r/min，裝液量為100mL/500mL。在搖瓶水平確定添加1％的大豆油、葵花籽油、花生油和芝麻油均能提高灰樹花菌絲體干重。
　　 通過(guò)HPLC法測(cè)定出灰樹花發(fā)酵液中含有3種多糖組分，它們的出峰時(shí)間分別為6.489、9.854和10.286min。同時(shí)測(cè)定出醇沉后的上清液中含有6種小分

4、子物質(zhì)，它們的出峰時(shí)間分別為6.820、8.184、10.933、11.386、12.100和14.152min。其中，在8.184min出峰的組分為葡萄糖，在12.100min出峰的組分為麥芽糖。
　　 通過(guò)三氯化鐵反應(yīng)、氫氧化鈣沉淀反應(yīng)、明膠沉淀反應(yīng)、醋酐-濃硫酸反應(yīng)、三氯醋酸反應(yīng)、氯仿-濃硫酸反應(yīng)和亞硝酸鈉-三氯化鋁反應(yīng)分別對(duì)灰樹花發(fā)酵液中的鞣質(zhì)、皂苷和黃酮進(jìn)行定性分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性，證明灰樹花發(fā)酵液中不含有這三種物質(zhì)。