基于CREB介導(dǎo)的信號通路探討電針“神庭”、“百會”對腦缺血后認(rèn)知障礙治療機(jī)制.pdf

1、目的：通過大腦中動脈阻塞（MCAO）法建立局灶性腦缺血再灌注的認(rèn)知障礙大鼠模型，采用電針“神庭”、“百會”，觀察其作用療效，同時進(jìn)行動物認(rèn)知行為學(xué)的評估及利用分子生物學(xué)技術(shù)，初步探究 CREB介導(dǎo)的相關(guān)信號通路與電針“神庭”、“百會”之間的關(guān)聯(lián)性，探討電針“神庭”、“百會”改善認(rèn)知障礙的作用機(jī)制。
　　方法：根據(jù)預(yù)實驗，將60只健康雄性 SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組（16只）、模型組（22只）和電針組（22只）。通過大腦中動脈線栓法（

2、MCAO）建立局灶性腦缺血再灌注的認(rèn)知障礙模型，電針“神庭”、“百會”進(jìn)行干預(yù)，每天一次，每次30min，共10天，每天電針結(jié)束后采用 Longe法進(jìn)行動物神經(jīng)功能學(xué)評分，Morris水迷宮評估模型大鼠空間學(xué)習(xí)、記憶能力；TTC染色觀察電針對模型大鼠腦梗塞體積的影響；免疫組織化學(xué)法檢測腦缺血再灌注大鼠海馬區(qū) CREB、p-CREB、NGF、c-fos蛋白表達(dá)水平及 RT-PCR技術(shù)檢測 CREB、NGF、c-fos基因表達(dá)水平。

3、　　結(jié)果：
　　1.大鼠神經(jīng)行為學(xué)評分發(fā)現(xiàn)：假手術(shù)組未出現(xiàn)神經(jīng)功能缺損癥狀。從造模后第3天開始電針組大鼠評分開始下降，模型組與電針組相比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；電針后第4天開始進(jìn)行水迷宮實驗，電針組大鼠在90秒內(nèi)找到平臺逃避潛伏期明顯縮短，與模型組相比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，說明電針“神庭”、“百會”可以改善模型大鼠的空間學(xué)習(xí)能力。電針治療的第9天，撤去平臺后測動物在90秒內(nèi)經(jīng)過平臺所在位置的次數(shù)，結(jié)果顯示電針組大鼠經(jīng)過平臺所在位置

4、的次數(shù)明顯多于模型組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，說明電針“神庭”、“百會”可以改善模型大鼠的空間記憶能力；
　　2.TTC染色結(jié)果顯示：電針后第10天，大鼠腦梗塞體積電針組明顯小于模型組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，說明電針可以明顯縮小模型大鼠腦梗塞體積，對缺血腦組織具有神經(jīng)保護(hù)作用；
　　3.免疫組織化學(xué)法檢測腦缺血再灌注大鼠海馬區(qū)CREB、p-CREB、NGF、c-fos蛋白表達(dá)水平結(jié)果顯示：與假手術(shù)組相比，模型組大鼠海馬區(qū)CREB、

5、p-CREB、NGF、c-fos蛋白表達(dá)明顯減少，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；與模型組相比，電針組大鼠海馬區(qū)CREB、p-CREB、NGF、c-fos較模型組明顯升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；
　　4.RT-PCR結(jié)果顯示：與假手術(shù)組相比，模型組大鼠海馬區(qū)CREB、NGF及c-fos mRNA表達(dá)明顯減少，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。同模型組相比，電針組大鼠海馬區(qū)組織中CREB、NGF及c-fos mRNA表達(dá)明顯增加，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。