大鼠胰腺不同發(fā)育階段NBC1的表達(dá)研究.pdf

1、運(yùn)用高密度寡核苷酸芯片建立大鼠胰腺發(fā)育不同階段(胚胎(E)12.5，E15.5，E18.5，新生和成年)的基因表達(dá)譜，經(jīng)過生物信息學(xué)數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)許多與胰腺功能相關(guān)的基因在E18.5相對(duì)高表達(dá)，提示胚胎發(fā)育后期胰腺功能正趨于完善和成熟，這個(gè)時(shí)期是形成典型胰腺結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵階段，而胰腺結(jié)構(gòu)是胰腺發(fā)揮正常生物學(xué)功能的基礎(chǔ)。本研究從基因表達(dá)譜中篩選出NBC1(electrogenic Na+-HCO3-cotransporter)在E18.5相對(duì)性

2、高表達(dá)，旨在初步探討NBC1在胰腺發(fā)育不同階段的表達(dá)及組織細(xì)胞學(xué)定位。 運(yùn)用RT-PCR技術(shù)進(jìn)一步檢測(cè)NBC1在大鼠胰腺發(fā)育不同階段的mRNA表達(dá)水平，結(jié)果顯示NBC1基因表達(dá)趨勢(shì)與基因芯片檢測(cè)結(jié)果相同；分別用蛋白免疫印跡及免疫熒光技術(shù)檢測(cè)NBC1蛋白在大鼠胰腺發(fā)育不同階段(胚胎(E)E15.5、E18.5、新生后(P)0、P7、P14、P21和成年(Adult))的表達(dá)及細(xì)胞組織學(xué)定位，結(jié)果顯示NBC1在大鼠胰腺發(fā)育E15.5

3、開始出現(xiàn)表達(dá)，E18.5特異表達(dá)出現(xiàn)最高峰，新生下降直到P7第一個(gè)表達(dá)最低點(diǎn)，生后P14又上升形成第二個(gè)高峰，之后下降直到成年形成第二個(gè)表達(dá)最低點(diǎn)。NBC1在胰腺的組織細(xì)胞學(xué)定位隨著胰腺發(fā)育階段的變化而變化；胚胎期彌散分布在胰腺內(nèi)、外分泌細(xì)胞；新生之后隨著胰腺結(jié)構(gòu)的清晰可辨可發(fā)現(xiàn)NBC1表達(dá)在外分泌腺泡基底側(cè)膜和頂側(cè)膜及胰島α、β細(xì)胞膜，與腺泡細(xì)胞相比在成年期NBC1更集中于β細(xì)胞。 以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明NBC1在胚胎發(fā)育中后期和胰