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1、廣東醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文Survivin表達對鼻咽癌放射存活細胞放射抗拒的影響及姜黃素的放射增敏姓名:畢宏申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師:孫寧20070501Survivin表達對鼻咽癌放射存活細胞放射抗拒的影響及姜黃素的放射增敏摘要【目的】鼻咽癌放療后的存活細胞放射抗性增加,是引起鼻咽癌復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)Sutvivin是新近發(fā)現(xiàn)的放射抗拒相關(guān)基因。本實驗探討Survivin表達對鼻咽癌發(fā)生發(fā)展及放療后復(fù)發(fā)的影響;觀察
2、鼻咽癌細胞的自發(fā)性凋亡及放射誘導(dǎo)凋亡、Survivin表達及其與放射敏感性的關(guān)系;探討姜黃素及分次放療聯(lián)合姜黃素對放射抗拒細胞的Survivin表達及對其放射敏感性的影響,尋找以Survivin為靶點的放射增敏方法【方法】采用免疫組化sP法檢測3l例放療后復(fù)發(fā)鼻咽癌、30例鼻咽非角化型鱗癌、30例鼻咽粘膜慢性炎中Survivin、Caspase3的表達對CNE2Z放射后存活細胞Trl2給予單次劑量為6Coy的照射,獲得再放射后存活細胞R
3、18。對Ct恨2Z、Trl2及RIB細胞采用MTT法繪制生長曲線;平板克隆形成實驗繪制細胞放射存活曲線。流式細胞術(shù)、Hoechst33342/PI雙熒光活染法檢測CNE2Z和R18的自發(fā)性凋亡及放射誘導(dǎo)凋亡的情況:RTPCR檢測不同時間點和不同劑量射線處理后的CNB2Z和RIB的survivinmRNA的表達;比色法檢測Caspase3活性。免疫細胞化學(xué)檢測不同濃度姜黃素對Trl2細胞Suxvivin表達的影響,平板克隆形成實驗檢測低濃
4、度姜黃素對Trl2細胞的放射增敏作用。對低濃度姜黃素與分次放療處理過的RIB細胞,用RTPCR檢測survivinmRNA的表達;比色法檢測其Caspase3活性?!窘Y(jié)果】(1)Survivin、Caspase3表達的陽性率,鼻咽粘膜慢性炎分別為2333%(7/30)和9667%(29,30),在鼻咽非角化型鱗癌中分別為7333%(22/30)和1667%(5/30),在放療后復(fù)發(fā)鼻咽癌分別為8387%(26,31),2258/0(7,
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