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文檔簡介
1、目的:觀察噪聲應(yīng)激不同時程對大鼠觸液核P38MAPK的表達(dá)和腦脊液P38MAPK含量的影響,探討腦脊液中物質(zhì)變化的來源及其與應(yīng)激行為的關(guān)系。
方法:將成年雄性Sprague-Dawley大鼠隨機(jī)分為正常組;噪聲1d,3d,5d,7d,10d,14d組。制作1d,3d,5d,7d,10d,14d不同時程的噪聲應(yīng)激模型,并與正常組對照,記錄應(yīng)激行為。用免疫組化雙標(biāo)及Westem blot法觀察上述時間點(diǎn)p38MAPK在觸液核上
2、的表達(dá)情況及腦脊液中p38MAPK含量的變化。利用Photoshop圖像分析系統(tǒng)對Western blot染色條帶測量后進(jìn)行半定量分析。
結(jié)果:(1)行為學(xué)測定:正常組與噪聲應(yīng)激刺激1d,3d,5d,7d,10d,14d組比較均有差異19±21:38±11;35±10;37±8;834-8:32±9;16±12;均為增多趨勢(P<0.05),7d時達(dá)增多最高峰,83±8;11.0±3.2:12.0±3.6(P<0.01);
3、10d,14d與7d組比較為下降趨勢且(P<0.05)。
(2)免疫組化雙重標(biāo)記:在正常觸液核中出現(xiàn)CB-HRP;p38MAPK:CB-HRP/p-p38MAPK三種標(biāo)記細(xì)胞,其中被CB-HRP標(biāo)記的的兩個神經(jīng)細(xì)胞簇細(xì)胞計(jì)數(shù)為32±4,其他腦區(qū)未見CB-HRP標(biāo)記神經(jīng)細(xì)胞簇。正常組細(xì)胞簇內(nèi)僅有個別神經(jīng)元見有CB-HRP/p-p38MAPK;噪聲應(yīng)激刺激1d,3d,5d,7d,10d,14d時CB-HRP/p-p38MAPK
4、雙重標(biāo)記神經(jīng)元數(shù)目分別為:0.8±1.2;6.0±5.6;5.3±4.1:5.6±3.6;12.6±3.6;5.5±4.5;0.6±0.7(P<0.05);噪音應(yīng)激10d,14d組與7d組比較,CB-HRP/p-p38MAPK雙重標(biāo)記神經(jīng)元數(shù)目顯著減少(P<0.05)。
(3)Western。Blot檢測:正常組腦脊液內(nèi)僅見有極少p38MAPK;噪聲應(yīng)激刺激1d,3 d,5d,7d,lOd,14d時,p-p38MAPK較正
5、常組顯著增多(P<0.05);10d,14d時與7d組比較,p.p38MAPK數(shù)目顯著減少(P<0.05)。
結(jié)論:(1)觸液核中的p38MAPK參與了機(jī)體對噪聲應(yīng)激的信息傳遞或調(diào)控,其作用隨應(yīng)激天數(shù)增加而先日趨增加后下降。
(2)腦脊液中的p38MAPK的含量隨應(yīng)激天數(shù)增加先日趨增加后逐漸下降。
(3)觸液核和腦脊液中p38MAPK含量的變化時相一致,其規(guī)律均是先增加后下降且高峰均在第七天出現(xiàn)
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