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文檔簡介
1、目的:本實驗用血清藥理學方法研究生芪復方中藥在體外實驗中對葡萄糖消耗的影響并對其機制進行初步探討。
方法:1.選用與胰島β細胞功能相似的INS--1細胞株,設(shè)溶媒對照組、生芪復方中藥處理組、格列齊特陽性對照組,酶聯(lián)免疫吸附法測定各實驗組在不同濃度葡萄糖培養(yǎng)基中胰島素釋放情況。2.選用國際通用脂肪細胞誘導分化方案誘導3T3-L1脂肪前體細胞為成熟脂肪細胞,油紅0染色鑒定,地塞米松誘導胰島素抵抗模型,設(shè)溶媒對照組、模型組、生芪
2、復方中藥處理組、羅格列酮陽性對照組,葡萄糖氧化酶法檢測葡萄糖消耗量,四甲基偶氨唑鹽(MTT)法檢測細胞活力并對葡萄糖消耗量進行標化,逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈式反應(yīng)技術(shù)(PT-PCR)測定葡萄糖轉(zhuǎn)運體4(GLUT4)mRNA含量。3.選用人源肝癌HepG2細胞株,同時采用高胰島素誘發(fā)HepG2細胞建立胰島素抵抗模型,設(shè)溶媒對照組、模型組、生芪復方中藥處理組、羅格列酮陽性對照組,葡萄糖氧化酶法檢測葡萄糖消耗量,MTT法檢測細胞活力并對葡萄糖消耗量進
3、行標化,PT-PCR法測定葡萄糖轉(zhuǎn)運體2(GLUT2)mRNA含量。
結(jié)果:1.在不同濃度葡萄糖培養(yǎng)基中各劑量生芪復方中藥與相應(yīng)濃度的溶媒對照組比較促INS--1細胞胰島素釋放作用均無顯著差異(P均>0.05),而格列齊特各劑量均較相應(yīng)濃度的其他兩組有顯著促分泌作用(P均<0.05)。2.生芪復方中藥處理組3T3-L1葡萄糖消耗明顯高于模型組(P均<0.05),與羅格列酮組比較差異無顯著性(P>0.05),降糖作用呈濃度依
4、賴性,并且隨培液中葡萄糖濃度的升高而呈降低趨勢,同時生芪復方中藥處理組與羅格列酮組GLUT4mRNA均明顯高于模型組(P均<0.05)。3.生芪復方中藥處理組HepG2葡萄糖消耗明顯高于模型組(P均<0.05),與羅格列酮組比較差異無顯著性(P>0.05),降糖作用呈濃度依賴性,并且隨培液中葡萄糖濃度的升高而呈降低趨勢,同時生芪復方中藥處理組與羅格列酮組GLUT2mRNA均明顯高于模型組(P均<0.05)。
結(jié)論:生芪復方
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