蛋氨酸對瓦氏黃顙魚幼魚生長和代謝的影響.pdf

1、本文以我國重要的淡水種類瓦氏黃顙魚(Pelteobagrus vachelli)為養(yǎng)殖對象,在室內循環(huán)水系統(tǒng)中進行70d的攝食生長實驗,研究飼料蛋氨酸對瓦氏黃顙魚幼魚生長和代謝的影響及半胱氨酸對蛋氨酸的節(jié)約作用。主要研究內容及結果如下:
　　1.瓦氏黃顙魚蛋氨酸代謝基因的克隆、序列分析和組織差異性表達分析
　　利用同源性克隆和3’RACE、5’RACE技術克隆瓦氏黃顙魚蛋氨酸腺苷轉移酶(MAT1A)cDNA全長序列以及胱硫醚

2、β合酶(CBS)、甜菜堿同型半胱氨酸甲基轉移酶(BHMT)和蛋氨酸合酶(MS)cDNA片段序列。克隆得到的瓦氏黃顙魚MAT1A(KJ489307)cDNA全長2427bp,包括5’端非編碼區(qū)(UTR)172bp、開放閱讀框(ORF)1173bp、3’端UTR1082bp和編碼390個氨基酸。BHMT(KJ489308)核心片段長度為729bp、MS(KJ489309)核心片段長度為501bp和CBS(KJ489310)核心片段長度為92

3、0bp。采用實時熒光定量PCR技術確定蛋氨酸(Met)代謝的主要表達組織,結果顯示,肝臟中Met代謝基因表達量最高,胃部表達量最低,表明肝臟是Met代謝基因的主要表達組織。
　　2.瓦氏黃顙魚幼魚蛋氨酸需求量的研究
　　在基礎飼料中分別添加0.0、0.3、0.6、0.9、1.2和1.5 g/100g的晶體DL-Met,以L-Glu作為等氮替代物,配制6組等氮等脂飼料(Met的實測值為0.40、0.73、1.04、1.33、1

4、.70和1.98 g/100g飼料),并利用實時熒光定量PCR研究蛋氨酸含量對代謝酶基因表達的影響。研究結果表明,蛋氨酸含量對實驗魚存活率、魚體組成、肝指數(shù)、肝臟谷草轉氨酶活力(GOT)、肝臟還原型谷胱甘肽(GSH)含量和血漿溶菌酶活力均無顯著性影響(P>0.05)。以特定生長率(SGR)為評價指標,經(jīng)二次擬合曲線可得瓦氏黃顙魚幼魚Met的需求量是1.36％飼料(3.25%蛋白)。隨著飼料蛋氨酸含量的增加,肝臟谷丙轉氨酶(GPT)活力呈

5、現(xiàn)先升高后降低的變化趨勢,最高值出現(xiàn)在投喂Met含量為1.7%飼料組(P<0.05)。隨著飼料中蛋氨酸含量的增加,血漿中的 GPT活力呈現(xiàn)先升高后平穩(wěn)的變化趨勢,且拐點出現(xiàn)在投喂蛋氨酸含量1.04%(P<0.05)飼料組,而血漿中GOT活力呈現(xiàn)先升高后降低的變化趨勢,且最大值出現(xiàn)在投喂蛋氨酸含量為0.73%(P<0.05)飼料組。隨著飼料蛋氨酸的增加,MAT、CBS、MS顯著上調(P<0.05);BHMT無顯著性差異(P>0.05)。<

6、br>　　3.半胱氨酸對蛋氨酸的節(jié)約作用
　　以蛋氨酸含量為1.33%的飼料為基礎飼料(同第二個實驗的飼料四),在保證總含硫氨基酸(TSAA)量恒定的情況下,以半胱氨酸(Cys)添加量分別替補蛋氨酸(Met)添加量的0%、25%、50%、75%和100%,配制成5組等氮等脂的實驗飼料(Met的實測值為1.30、1.08、0.85、0.63和0.40%飼料;Cys實測值0.34、0.56、0.79、1.01和1.24%飼料)。結果表

7、明,飼料Cys對瓦氏黃顙魚幼魚的存活率、魚體組成、肝指數(shù)、肝臟谷草轉氨酶(GOT)、肝臟還原型谷胱甘肽(GSH)含量和血漿溶菌酶活力均無顯著性影響。以特定生長率(SGR)為評價指標,經(jīng)二次擬合曲線可得瓦氏黃顙魚幼魚最適Cys需求量是0.77%飼料(1.84%蛋白),可替代50%的Met添加量,占TSAA的48%。隨著飼料中Cys含量的增加,肝臟谷丙轉氨酶(GPT)活力呈現(xiàn)先升高后降低的變化趨勢,最高值出現(xiàn)在投喂Cys含量為0.79%飼料