14-3-3σ表達(dá)及其SNPs在胃癌發(fā)生發(fā)展中的意義.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、研究背景:
  14-3-3蛋白家族是一類廣泛存在于真核生物中的高度保守的可溶性蛋白,在人類的生命活動(dòng)中發(fā)揮多種生理及病理功能,調(diào)控細(xì)胞周期以及細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、存活、凋亡、遷移。其亞型14-3-3σ蛋白與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展有一定關(guān)系。
  目的:
  1.探討14-3-3σ在胃癌中的表達(dá)意義及其與臨床病理學(xué)特征之間的關(guān)系;
  2.研究14-3-3σ基因兩個(gè)SNPs位點(diǎn)rs11542705、rs1883660多態(tài)

2、性與胃癌遺傳易感性的關(guān)系。
  方法:
  1.制作組織芯片:福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2001年1月-2010年12月手術(shù)切除的胃癌標(biāo)本存檔蠟塊,所有病例均有完整的隨訪資料278例。每例胃癌病例均選取癌旁正常胃粘膜組織、粘膜層胃癌組織、腫瘤中央?yún)^(qū)胃癌組織、侵襲前沿區(qū)胃癌組織和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶胃癌組織共5個(gè)位點(diǎn),其中39例另選取腸化胃粘膜組織1個(gè)位點(diǎn),每個(gè)位點(diǎn)3條組織芯制作組織芯片;
  2.免疫組化染色檢測(cè)組織芯片14-3

3、-3σ蛋白的表達(dá)變化;
  3.PCR-LDR技術(shù)檢測(cè)14-3-3σ基因2個(gè)SNP位點(diǎn)的多態(tài)性:選取福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2001年1月-2010年12月手術(shù)切除的胃癌標(biāo)本存檔蠟塊正常胃粘膜組織200例和健康體檢、無(wú)腫瘤病史及腫瘤家族史的200人的血液為對(duì)照組,分別提取組織和血液基因組DNA,PCR-LDR技術(shù)檢測(cè)14-3-3σ基因2個(gè)SNPs位點(diǎn)rs11542705、rs1883660的基因型以及等位基因頻率分布,并行測(cè)序驗(yàn)證

4、。
  結(jié)果:
  1.14-3-3σ蛋白陽(yáng)性顆粒主要定位于細(xì)胞漿,呈棕黃色顆粒狀,在正常胃粘膜上皮細(xì)胞中不表達(dá)或微表達(dá),腸化黏膜上皮細(xì)胞中表達(dá)程度明顯高于未腸化者;
  2.胃腺癌組織14-3-3σ表達(dá)高于正常胃粘膜腺上皮;
  3.從黏膜層進(jìn)展至侵襲前沿,胃腺癌組織14-3-3σ表達(dá)程度呈下降趨勢(shì);而從侵襲前沿至淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶,胃腺癌14-3-3σ表達(dá)呈上升趨勢(shì);
  4.早期胃癌黏膜層癌組織14-3-3

5、σ蛋白表達(dá)水平明顯高于進(jìn)展期胃癌黏膜層癌組織;
  5.高、中、低分化及未分化腺癌14-3-3σ表達(dá)程度高于粘液腺癌、印戒細(xì)胞癌;
  6.腸型及混合型胃腺癌組織表達(dá)14-3-3σ程度高于彌漫型胃腺癌組織;
  7.腫瘤中央?yún)^(qū)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶胃癌組織14-3-3σ表達(dá)與胃癌患者術(shù)后生存時(shí)間呈負(fù)相關(guān);
  8.14-3-3σ基因的兩個(gè)SNPs位點(diǎn)rs11542705、rs1883660的基因型和等位基因頻率分布在對(duì)照

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