神經(jīng)導向蛋白Semaphorin 3E在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用和機制的研究.pdf

1、目的:神經(jīng)導向蛋白Semaphorin3E(Sema3E)在多種腫瘤中表達上調(diào)并能夠促進腫瘤細胞轉(zhuǎn)移，抑制腫瘤細胞凋亡，但對其在胃癌發(fā)生過程中的研究尚屬空白，且Sema3E在腫瘤中異常表達的機制目前還未被闡明。本研究主要探討Sema3E在胃癌生長、轉(zhuǎn)移和侵襲中的作用及其機制，并分析表觀遺傳學改變對Sema3E轉(zhuǎn)錄調(diào)控的影響。
　　方法:1、采用聚合酶鏈式反應和免疫組織化學等技術(shù)方法分析胃癌組織中Sema3E mRNA和蛋白表達水平

2、與正常組織相比的變化情況。2、使用DAC，TSA，MGCD0103，MC1568，C646等特異性化學抑制劑，過表達和基因敲減組蛋白乙?；竝300，熒光素酶報告系統(tǒng)等方法研究表觀遺傳學變化在SEMA3E轉(zhuǎn)錄調(diào)控中的作用機制。3、構(gòu)建SEMA3E真核表達載體，研究過表達Sema3E對胃癌細胞增殖能力，克隆形成能力，裸鼠皮下成瘤能力，遷移能力以及體外重組基底膜侵襲能力的影響，并對其分子機制進行分析。
　　結(jié)果:1、聚合酶鏈式反應和免

3、疫組織化學等實驗結(jié)果顯示Sema3E的mRNA水平和蛋白水平在胃癌樣本中表達明顯下調(diào)。2、Ⅰ類組蛋白去乙?；?HDAC)和組蛋白乙?；竝300參與SEMA3E在胃癌細胞中的轉(zhuǎn)錄調(diào)控。3、過表達Sema3E能夠有效抑制BGC-823、MGC-803、MKN-45等胃癌細胞株在體外的細胞增殖能力和克隆形成能力;抑制MGC-803體外遷移能力和重組基底膜侵襲能力;并在體內(nèi)抑制裸鼠皮下移植瘤的生長。Sema3E通過細胞周期G0/G1期阻滯，

4、促進腫瘤細胞凋亡和降低細胞信號通路中ERK、AKT等酶的磷酸化水平，發(fā)揮了對胃癌細胞增殖的抑制作用;通過抑制twist表達進而促進E-Cadherin表達上調(diào)，抑制ERK和AKT磷酸化進而抑制胃癌細胞的遷移和重組基底膜侵襲。
　　結(jié)論:本研究表明，胃癌中Sema3E表達下調(diào)與表觀遺傳學調(diào)控的失衡密切相關，胃癌中組蛋白去乙?；负徒M蛋白乙?；副磉_異常導致Sema3E的表達下調(diào);Sema3E對胃癌發(fā)生發(fā)展具有重要作用。綜上所述，在胃