骨保護蛋白與抗骨質(zhì)疏松藥物——基礎(chǔ)與臨床研究.pdf

1、目的： 1.利用骨保護蛋白（OPG ,osteoprotegerin）基因剔除小鼠模型，研究OPG基因缺失情況下，選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑Raloxifene（雷洛昔芬）的抗骨質(zhì)疏松作用和機制。 2.比較骨質(zhì)疏松患者在用阿倫磷酸鈉治療前后的骨密度，血清OPG，性激素，骨代謝指標等，探討骨保護蛋白OPG濃度在骨質(zhì)疏松發(fā)生及藥物治療過程中的作用。 方法： 1.取3月齡OPG基因剔除的純合子、野生型小鼠各40只，

2、雌雄各半，其中半數(shù)予以雷洛昔芬灌胃，另一半為對照組。以3mg/kg/d雷洛昔芬的劑量喂藥一月后，殺鼠取材。分別測骨密度、骨生物力學(xué)、骨形態(tài)計量學(xué)，破骨細胞染色，并檢測血清OPG、核因子kB 受體(RANKL)和骨組織OPG、RANKLmRNA表達，比較純合子小鼠喂藥組和安慰劑組的指標，評價雷洛昔芬是否有改善骨質(zhì)疏松作用及探討可能的作用機制。 2．隨機選取老年男性骨質(zhì)疏松患者42名及年齡匹配的健康對照組，檢測血清OPG濃度，比較O

3、PG在兩組中的差別。所有骨質(zhì)疏松患者接受阿倫磷酸鈉治療2年，比較治療前后骨密度、血清OPG、性激素全套、血鈣磷、甲狀旁腺素、骨鈣素、尿Ⅰ型膠原氨基端交聯(lián)肽（尿NTX）、尿鈣、尿肌酐等的變化，探討OPG在骨質(zhì)疏松治療中的作用。 結(jié)果： 1. OPG-/-純合子小鼠呈現(xiàn)明顯的骨質(zhì)疏松癥狀，予以雷洛昔芬治療后，OPG-/-純合子雌鼠出現(xiàn)下述變化：腰椎、股骨骨密度明顯增高（腰椎：0.077±0.019 g/cm3 ，P=0.02

4、；股骨 0.084±0.016 g/cm3，P=0.02）；骨生物力學(xué)示腰椎、股骨的最大載荷（腰椎：56.29±18.31N P=0.00046；股骨：11.68±8.17N P=0.02），彈性模量(腰椎p=0.048，股骨P=0.03)，結(jié)構(gòu)韌性（腰椎P=0.004，股骨P=0.01)均增高，提示骨折風(fēng)險性下降；破骨細胞染色示腰椎破骨細胞面積由17.95％降至8.42％（P=0.001），股骨由15.03％降至7.02％（P=0.0

5、1)；H.E染色示骨小梁數(shù)目增加，連接性上升；骨形態(tài)計量學(xué)結(jié)果骨形成率由8.05±4.02mm3/mm2/year降至5.48±1.89mm3/mm2/year（P=0.046)；血清RANKL在OPG缺失情況下明顯升高(P<0.01)，mRNA表達也明顯增加，灌服雷洛昔芬后，血清蛋白水平和基因表達水平均降低；雷洛昔芬用藥組和安慰劑組的雌激素水平無變化。OPG-/-純合子雄鼠在雷洛昔芬治療后未出現(xiàn)上述變化。 2.老年男性骨質(zhì)疏松

6、患者血清OPG高于正常老年對照組（P=0.01），骨鈣素（P=0.015）、甲狀旁腺素(P=0.016)、尿NTX(P=0.020)濃度明顯升高，睪酮則低于正常組（P=0.039）。阿倫磷酸鈉治療后，骨密度明顯上升，血清OPG下降，骨鈣素、甲狀旁腺素、尿NTX也明顯下降。Spearman相關(guān)分析顯示治療前后骨密度的改變與OPG的變化有關(guān)，血清OPG濃度的變化與睪酮相關(guān)（r=-0.42,P<0.05）。 結(jié)論： 1.選擇性