2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、微流控芯片技術應用于細胞研究具有高通量、高效率、對細胞破壞小、與生理環(huán)境相似程度高等優(yōu)勢。目前,大量研究報道了微流控芯片技術在細胞分選、培養(yǎng)、基于細胞水平藥物篩選等方面的應用,特別是在CTCs檢測及生物學研究方面,微流控芯片技術已經(jīng)成為一種富有前景的分析工具。但是相關研究在細胞選擇性、捕獲效率、操作集成度、檢測靈敏度等方面仍存在不足,不能滿足含量極少的CTCs的臨床研究,該研究的發(fā)展還有賴于微流控芯片技術的不斷改進。
  主要研究

2、工作及成果如下:
  1、設計并制作用于腫瘤細胞捕獲及藥物篩選的微流控細胞芯片。在綜述國內外研究現(xiàn)狀的基礎上,基于微流控芯片分析技術和MEMS加工工藝,自行設計并制作含陣列微磁柱和集成6×6陣列微腔的細胞芯片。含陣列微磁柱細胞芯片中微磁柱可以產生高磁場力,并能有效增大接觸面積,實現(xiàn)對磁性顆粒的高效捕獲;6×6陣列的圓形腔體能夠實現(xiàn)梯度濃度藥物的高通量篩選。
  2、基于內吞法和免疫法對Hep-G2細胞進行磁標記,采用含陣列微

3、磁柱細胞芯片,實現(xiàn)細胞混懸液中磁標記細胞的分離捕獲。在細胞磁標記實驗中優(yōu)化了磁珠用量(0.2mg)、孵育時間(胞吞法6 h,免疫法30 min)等因素。分別采用含陣列微磁柱細胞芯片對內吞法制備的DCIONP-HepG2細胞(DCIONP,葡聚糖包裹超順磁性Fe3O4納米顆粒)和免疫法制備的IMBs-HepG2細胞(IMBs,免疫磁珠)進行分離捕獲:進樣流速為25μL/min,對DCIONP-HepG2細胞的捕獲率為71%±5.57,而對

4、血細胞的捕獲率僅為7.33%±4.51,對腫瘤細胞的特異性捕獲率為65.67%±2.89,而對血細胞的非特異性捕獲率為7.1%±0.83,干擾較小。當血細胞濃度為100個/mL時,對DCIONP-HepG2細胞的檢測限為5個/mL,對IMBs-HepG2細胞的檢測限為8個/mL;當血細胞濃度為1000個/mL時,對DCIONP-HepG2細胞的檢測限為8個/mL,對IMBs-HepG2細胞的檢測限為10個/mL??傊?,含陣列微磁柱細胞芯

5、片中微磁柱可以產生高磁場力,并能有效增大接觸面積,以低濃度肝癌細胞Hep-G2為樣本,開展Hep-G2磁標記和片上捕獲研究,可實現(xiàn)癌細胞Hep-G2特異性捕獲,這為微流控細胞芯片應用于CTCs水平奠定了前期實驗基礎。
  3、采用集成6×6陣列微腔細胞芯片,開展天然產物提取物香柑內酯對肝癌細胞Hep-G2生長影響的測試,用以對具有抗腫瘤活性藥物實現(xiàn)藥效的初步篩選。利用該芯片系統(tǒng)成功實現(xiàn)了肝癌細胞Hep-G2連續(xù)72 h的片上培養(yǎng),

6、臺盼藍染色實驗顯示細胞存活率達到90%以上。以系列濃度的香柑內酯處理細胞12~48 h,CFSE染色后,采用原位熒光檢測方法對細胞活性進行定性及定量檢測。與對照組相比,實驗組腔體中細胞較為稀疏,細胞間隙大,部分細胞變圓,體積變小,甚至于脫落,隨培養(yǎng)基的更替流出腔體。因此香柑內酯能有效抑制人肝癌細胞Hep-G2的增殖,且呈濃度-時間依賴性,半數(shù)抑制濃度IC50約為47.5μmol/L。結果與常規(guī)實驗平臺MTT法檢測結果具有很好的相符性,顯

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