版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、微流控芯片技術應用于細胞研究具有高通量、高效率、對細胞破壞小、與生理環(huán)境相似程度高等優(yōu)勢。目前,大量研究報道了微流控芯片技術在細胞分選、培養(yǎng)、基于細胞水平藥物篩選等方面的應用,特別是在CTCs檢測及生物學研究方面,微流控芯片技術已經(jīng)成為一種富有前景的分析工具。但是相關研究在細胞選擇性、捕獲效率、操作集成度、檢測靈敏度等方面仍存在不足,不能滿足含量極少的CTCs的臨床研究,該研究的發(fā)展還有賴于微流控芯片技術的不斷改進。
主要研究
2、工作及成果如下:
1、設計并制作用于腫瘤細胞捕獲及藥物篩選的微流控細胞芯片。在綜述國內外研究現(xiàn)狀的基礎上,基于微流控芯片分析技術和MEMS加工工藝,自行設計并制作含陣列微磁柱和集成6×6陣列微腔的細胞芯片。含陣列微磁柱細胞芯片中微磁柱可以產生高磁場力,并能有效增大接觸面積,實現(xiàn)對磁性顆粒的高效捕獲;6×6陣列的圓形腔體能夠實現(xiàn)梯度濃度藥物的高通量篩選。
2、基于內吞法和免疫法對Hep-G2細胞進行磁標記,采用含陣列微
3、磁柱細胞芯片,實現(xiàn)細胞混懸液中磁標記細胞的分離捕獲。在細胞磁標記實驗中優(yōu)化了磁珠用量(0.2mg)、孵育時間(胞吞法6 h,免疫法30 min)等因素。分別采用含陣列微磁柱細胞芯片對內吞法制備的DCIONP-HepG2細胞(DCIONP,葡聚糖包裹超順磁性Fe3O4納米顆粒)和免疫法制備的IMBs-HepG2細胞(IMBs,免疫磁珠)進行分離捕獲:進樣流速為25μL/min,對DCIONP-HepG2細胞的捕獲率為71%±5.57,而對
4、血細胞的捕獲率僅為7.33%±4.51,對腫瘤細胞的特異性捕獲率為65.67%±2.89,而對血細胞的非特異性捕獲率為7.1%±0.83,干擾較小。當血細胞濃度為100個/mL時,對DCIONP-HepG2細胞的檢測限為5個/mL,對IMBs-HepG2細胞的檢測限為8個/mL;當血細胞濃度為1000個/mL時,對DCIONP-HepG2細胞的檢測限為8個/mL,對IMBs-HepG2細胞的檢測限為10個/mL??傊?,含陣列微磁柱細胞芯
5、片中微磁柱可以產生高磁場力,并能有效增大接觸面積,以低濃度肝癌細胞Hep-G2為樣本,開展Hep-G2磁標記和片上捕獲研究,可實現(xiàn)癌細胞Hep-G2特異性捕獲,這為微流控細胞芯片應用于CTCs水平奠定了前期實驗基礎。
3、采用集成6×6陣列微腔細胞芯片,開展天然產物提取物香柑內酯對肝癌細胞Hep-G2生長影響的測試,用以對具有抗腫瘤活性藥物實現(xiàn)藥效的初步篩選。利用該芯片系統(tǒng)成功實現(xiàn)了肝癌細胞Hep-G2連續(xù)72 h的片上培養(yǎng),
6、臺盼藍染色實驗顯示細胞存活率達到90%以上。以系列濃度的香柑內酯處理細胞12~48 h,CFSE染色后,采用原位熒光檢測方法對細胞活性進行定性及定量檢測。與對照組相比,實驗組腔體中細胞較為稀疏,細胞間隙大,部分細胞變圓,體積變小,甚至于脫落,隨培養(yǎng)基的更替流出腔體。因此香柑內酯能有效抑制人肝癌細胞Hep-G2的增殖,且呈濃度-時間依賴性,半數(shù)抑制濃度IC50約為47.5μmol/L。結果與常規(guī)實驗平臺MTT法檢測結果具有很好的相符性,顯
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 微流控芯片用于循環(huán)腫瘤細胞高效捕獲的研究.pdf
- 微流控芯片平臺上細胞捕獲及藥物作用分析方法研究.pdf
- 細胞水平高通量藥物篩選的微流控芯片研究.pdf
- 基于微流控芯片實現(xiàn)循環(huán)腫瘤細胞精確計數(shù).pdf
- 基于微流控系統(tǒng)的腫瘤細胞侵襲力分析及相關藥物篩選.pdf
- 用于細胞篩選的微流控芯片的開發(fā)研究.pdf
- 基于微流控芯片的膀胱癌循環(huán)腫瘤細胞的特異性捕獲.pdf
- 單細胞捕獲微流控芯片的結構設計及其流場研究.pdf
- 一種用于循環(huán)腫瘤細胞捕獲的微流控芯片的模擬仿真與優(yōu)化.pdf
- 微流控芯片細胞培養(yǎng)和藥物誘導凋亡的研究.pdf
- 微流控芯片細胞鈣信號研究.pdf
- 微流控芯片單細胞分析.pdf
- 用于細胞捕獲的微繞流柱陣列芯片設計及制備.pdf
- 微流控芯片上單細胞分析的研究.pdf
- 基于細胞3D打印技術的腫瘤藥物篩選細胞芯片研究.pdf
- 基于微流控芯片的細胞分離、捕獲和分析的關鍵技術研究.pdf
- 用于單細胞分析的微流控芯片研究.pdf
- 微流控芯片高效捕獲乳腺癌細胞MDA-MB-231及再培養(yǎng)研究.pdf
- 基于Coulter原理的細胞計數(shù)微流控芯片研究.pdf
- 細胞圖型及微流控芯片上的細胞培養(yǎng)和分化.pdf
評論
0/150
提交評論