飽和氫生理鹽水對噪聲性聾的防治研究.pdf

1、目前越來越多的人受到噪聲性聾（Noise Induced Hearing Loss,NIHL）的困擾，噪聲性聾引起的感音神經(jīng)性聾多為不可逆損傷，目前尚無有效的治療方法。因此，預(yù)防成為研究的重點(diǎn)。最新研究發(fā)現(xiàn)，飲用飽和氫氣水可減輕白噪聲引起的聽力損害，但作用機(jī)理仍不明確，仍需全面深入的研究來揭示其規(guī)律特點(diǎn)。為此本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)通過腹腔注射飽和氫生理鹽水，首次從聽功能、形態(tài)學(xué)及生物化學(xué)等多方面來綜合探討飽和氫生理鹽水對脈沖噪聲引起的聽力損害的防治

2、作用及其保護(hù)機(jī)理。
　　本文主要從以下幾方面進(jìn)行了論述:
　　第一部分 飽和氫生理鹽水對噪聲性聾動(dòng)物保護(hù)模型的建立
　　目的：建立噪聲性聾動(dòng)物模型，初步驗(yàn)證飽和氫生理鹽水是否具有預(yù)防噪聲性聾的作用。
　　方法：取體重250～300g，清潔級(jí)白色健康、ABR閾值正常雄性Hartley豚鼠18只。隨機(jī)分成5組，正常組2只，空白對照組（單純噪聲暴露）、生理鹽水對照組（噪聲暴露前1小時(shí)腹腔注射等體積的生理鹽水，1ml/1

3、00g）、飽和氫生理鹽水組（單純腹腔注射飽和氫生理鹽水）、飽和氫生理鹽水處理組各4只，（噪聲暴露前1小時(shí)腹腔注射飽和氫生理鹽水，1ml/100g）。給予脈沖噪聲（壓力峰值157dB SPL，脈寬0.25ms）連續(xù)暴露100次。分別于脈沖噪聲暴露后4小時(shí)、14天處死動(dòng)物行掃描電鏡觀察。
　　結(jié)果：掃描電鏡結(jié)果顯示噪聲暴露后4小時(shí)毛細(xì)胞以底圈上半圈至第二圈下半圈損傷最重，空白對照組及生理鹽水對照組內(nèi)毛細(xì)胞纖毛廣泛性缺失、融合，外毛細(xì)胞

4、3排靜纖毛全部缺失。飽和氫生理鹽水處理組纖毛的缺失程度明顯少于對照組。噪聲暴露后14天的耳蝸毛細(xì)胞損傷重于噪聲暴露后4小時(shí)。
　　結(jié)論：成功構(gòu)建噪聲性聾動(dòng)物模型，初步驗(yàn)證飽和氫生理鹽水對噪聲性聾動(dòng)物模型具有一定的預(yù)防作用，可明顯減輕脈沖噪聲對內(nèi)耳的損害。
　　第二部分 飽和氫生理鹽水對噪聲性聾的預(yù)防及修復(fù)作用
　　目的：探索最佳給藥時(shí)間及飽和氫生理鹽水是否對噪聲性聾具有促進(jìn)修復(fù)的作用。
　　方法：通過噪聲暴露前即

5、刻、1小時(shí)、2小時(shí)腹腔注射飽和氫生理鹽水尋求最佳給藥時(shí)間，于脈沖噪聲暴露后即刻、1、2、4、8天測試聽性腦干反應(yīng)(auditory brainstem respons，ABR)；第8天采用琥珀酸脫氫酶(Succinate Dehydrogenase，SDH)、硝酸銀（AgNO3）及免疫組化染色等多種技術(shù)方法觀察毛細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化。
　　結(jié)果：ABR測試結(jié)果顯示噪聲暴露后在各時(shí)間點(diǎn)的AB R閾值飽和氫生理鹽水處理1小時(shí)、2小時(shí)組與對

6、照組均差異顯著。飽和氫生理鹽水處理1小時(shí)、2小時(shí)組ABR閾值恢復(fù)程度明顯快于空白對照組及鹽水對照組。形態(tài)學(xué)結(jié)果顯示飽和氫生理鹽水處理組動(dòng)物耳蝸外毛細(xì)胞雖存在SDH著色變淺，存在片狀無染色區(qū)的改變，與對照組相比，細(xì)胞腫脹現(xiàn)象減輕，細(xì)胞缺失數(shù)明顯減少，排列較規(guī)則,尤以飽和氫生理鹽水處理1小時(shí)組顯著。AgNO3染色與激光共聚焦結(jié)果同樣呈現(xiàn)飽和氫生理鹽水處理1小時(shí)、2小時(shí)組外毛細(xì)胞和纖毛缺失明顯減少的表現(xiàn)。
　　結(jié)論：噪聲暴露前1小時(shí)腹腔

7、注射飽和氫生理鹽水可有效拮抗脈沖噪聲引起的耳蝸損傷，能夠?qū)υ肼曅悦@起到一定程度的預(yù)防和修復(fù)作用。
　　第三部分 飽和氫生理鹽水對噪聲性聾的防治機(jī)理研究
　　目的：通過檢測豚鼠血漿中總超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase，T-SOD)活性、超氧陰離子（O2-）活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和及耳蝸組織中T-SOD及O2-活性來研究飽和氫生理鹽水對噪聲性聾的防治機(jī)理。<

8、br>　　方法：于噪聲暴露前和噪聲暴露后2h,分別取血測定血漿中的T-SOD及O2-活性、MDA含量；噪聲暴露后2h抽血后，立即斷頭處死豚鼠，取出雙側(cè)耳蝸，測定耳蝸組織中的T-SOD及O2-活性。
　　結(jié)果：各組血漿中的T-SOD及O2-活性、MDA含量在噪聲暴露前后均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，在噪聲暴露后各組間也無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P>0.05?？瞻讓φ战M與生理鹽水對照組耳蝸組織中的T-SOD活性無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P>0.05，但二者均與正常組和飽和

9、氫生理鹽水處理1小時(shí)組有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P<0.05。
　　結(jié)論：飽和氫生理鹽水具有抗氧化作用，可有效清除耳蝸組織中大量氧自由基，減輕噪聲引起的聽力損失。
　　第四部分 噪聲暴露對成年豚鼠動(dòng)脈血?dú)饧半娊赓|(zhì)的影響
　　目的：初步探討脈沖噪聲暴露對成年豚鼠動(dòng)脈血?dú)饧半娊赓|(zhì)的影響。
　　方法：各組分別于脈沖噪聲暴露后即刻、1h、2h、4h心包穿刺采血約1ml測動(dòng)脈血?dú)饧癒+、Na+、Cl-、Ca2+的濃度。
　　

10、結(jié)果：噪聲暴露后，空白對照組pH呈升高趨勢，但各組動(dòng)脈血?dú)鈖H值均保持在正常范圍內(nèi)波動(dòng)，各組間及各組在不同時(shí)間點(diǎn)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P>0.05；噪聲暴露后即刻、1h，空白對照組Ca2+濃度升高，與正常組、飽和氫生理鹽水組差異顯著，P<0.05；鉀離子濃度于噪聲暴露后即刻，空白對照組與飽和氫生理鹽水處理組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P<0.05；鈉離子濃度于噪聲暴露后即刻、1h、2h，正常組與其余各組間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P<0.05。
　　結(jié)論：脈沖