染色體G顯帶核型和MLPA檢測方法在自然流產(chǎn)絨毛組織染色體分析中的應(yīng)用價(jià)值探討.pdf

1、目的：以孕早期自然流產(chǎn)絨毛組織為研究對象，運(yùn)用傳統(tǒng)的絨毛細(xì)胞培養(yǎng)及染色體G顯帶核型分析方法結(jié)合多重連接依賴探針擴(kuò)增（Multiplex Ligation-dependent probe amplification，MLPA）技術(shù)分析自然流產(chǎn)的原因，并對兩種方法進(jìn)行比較以尋找孕早期適宜的產(chǎn)前診斷方法。
　　方法：對2010年1月至2010年12月在深圳市婦幼保健院婦產(chǎn)科及臨床遺傳?？崎T診就診的275例自然流產(chǎn)患者取絨毛組織，其中22

2、例為已污染標(biāo)本，對未污染的253例標(biāo)本進(jìn)行傳統(tǒng)的絨毛細(xì)胞培養(yǎng)及染色體 G顯帶核型分析，同時(shí)應(yīng)用檢測23對染色體亞端粒核酸序列拷貝數(shù)異常的試劑盒P036和P070檢測從絨毛組織中提取的基因組DNA作MLPA分析研究。
　　結(jié)果：245例成功培養(yǎng)的樣本中，有216例采用MLPA技術(shù)進(jìn)行染色體分析的非整倍體結(jié)果與G顯帶染色體核型分析方法的結(jié)果一致，包括正常核型108例、常染色體三體79例、常染色體雙三體3例、常染色體三三體2例、常染色體

3、單體合并常染色體三體1例、性染色體單體合并常染色體三體2例、性染色體單體17例、嵌合體1例和不平衡易位3例。其余29例標(biāo)本中，采用G顯帶染色體核型分析方法檢測出9例三倍體、5例四倍體、3例平衡易位、4例9號倒位、1例亞三倍體，1例超三倍體、1例三倍體合并9號倒位和1例嵌合體，而采用MLPA技術(shù)檢測結(jié)果均未見明顯的異常；另外G顯帶核型分析檢測到1例常染色體三體合并9號染色體臂間倒位和1例常染色體單體合并9號染色體臂間倒位，MLPA技術(shù)能分

4、別檢測出染色體三體和單體數(shù)量異常而未能檢測出平衡性結(jié)構(gòu)異常；此外MLPA檢測出1例Dup6p;dup6q（提示6號三體）和1例Dup8p;del11q（提示8號和11號的不平衡易位），G顯帶染色體核型分析結(jié)果均顯示為正常核型。MLPA技術(shù)對未培養(yǎng)或培養(yǎng)失敗的30例流產(chǎn)絨毛組織進(jìn)行分析，檢測出7例常染色體三體、1例性染色體單體、1例常染色體雙三體，其余21例均提示為正常的二倍體。
　　結(jié)論：胎兒染色體異常是早期自然流產(chǎn)的主要原因，經(jīng)

5、典的染色體核型分析能夠檢測出多倍體、亞多倍體、超多倍體、平衡易位等染色體結(jié)構(gòu)異常，是尋找自然流產(chǎn)病因遺傳學(xué)方面的金標(biāo)準(zhǔn)，多重連接依賴探針擴(kuò)增技術(shù)對非整倍體異常的檢出與經(jīng)典的染色體核型分析是一致的，同時(shí)它能快速的檢測出染色體非平衡結(jié)構(gòu)異常以及經(jīng)典染色體核型分析不能檢測的微缺失和微重復(fù)，是對傳統(tǒng)方法的補(bǔ)充和完善，兩者聯(lián)合應(yīng)用，相輔相成，對本次流產(chǎn)的原因做出準(zhǔn)確的判斷，并能有效的指導(dǎo)下一次懷孕。對早期懷孕的患者進(jìn)行多重連接依賴探針擴(kuò)增技術(shù)和絨