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文檔簡介
1、目的:
從動物組織器官水平、細胞水平、分子水平研究香菇多糖對慢性低劑量長期輻射的防護作用,并探討其防護機制,以期為研究多糖類藥物作用靶點提供實驗基礎(chǔ)。
方法:
1.用離子加速器照射昆明小鼠,以0.4Gy作為每天的吸收劑量,誘導(dǎo)建立長期低劑量輻射損傷小鼠模型。
2.觀察小鼠精神狀態(tài);記錄體重及皮毛變化;小鼠處死后記錄各臟器重量以計算臟器系數(shù);應(yīng)用HE染色法制做各臟器病理切片分析組織形
2、態(tài)學(xué)變化。以分析香菇多糖對長期低劑量輻射損傷小鼠的整體防護作用。
3.應(yīng)用ELISIA試劑盒法檢測小鼠肝臟中SOD、GSH-Px活性以及氧化產(chǎn)物MDA的含量;采用透射電鏡技術(shù)分析肝臟超微結(jié)構(gòu)的改變。以考察香菇多糖對慢性低劑量長期輻射的抗自由基作用。
4.采用MTT法檢測脾淋巴細胞增殖活性;用ELISIA試劑盒法分析脾細胞IL-2的分泌量;用透射電鏡法分析脾細胞超微結(jié)構(gòu)的改變。以考察香菇多糖對慢性低劑量長期輻射
3、的免疫防護作用。
5.采用一維SDS-PAGE法以及MALDI-TOF/TOF串聯(lián)飛行時間質(zhì)譜法對脾細胞膜蛋白進行定量定性分析,以探討香菇多糖對慢性低劑量長期輻射的分子水平的防護作用。
結(jié)果:
1.在動物整體水平上:香菇多糖能抑制輻射損傷小鼠的脫毛現(xiàn)象;調(diào)節(jié)輻射損傷小鼠的體重波動,抑制輻射前期體重的迅速增長及輻射后期體重的下降;能對輻射所引起的脾臟、肝臟、胸腺、肺臟損傷產(chǎn)生保護作用。
4、 2.在細胞水平上:香菇多糖能提高肝臟自由基清除體系酶的活性;降低膜脂質(zhì)氧化產(chǎn)物的生成;抑制血清中AST及ALT水平的異常增高;維持膜超微結(jié)構(gòu)的正常。LNT能刺激脾淋巴細胞的增殖活性;增加脾淋巴細胞分泌IL-2;維持脾細胞超微結(jié)構(gòu)的正常。
3.在分子水平上:香菇多糖可調(diào)節(jié)脾細胞膜上蛋白質(zhì)代謝相關(guān)蛋白、脂質(zhì)代謝相關(guān)蛋白、細胞骨架蛋白以及部分細胞轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白及離子通道蛋白的表達。
結(jié)論:
香菇多糖對長
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