弓形蟲(chóng)眼病小鼠模型的建立及實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景:
　　弓形蟲(chóng)病是全球分布的人獸共患的疾病，是弓形蟲(chóng)引起的全身性感染性寄生蟲(chóng)病。弓形蟲(chóng)病具體是由剛地弓形蟲(chóng)引起的，剛地弓形蟲(chóng)是一種能夠感染人和溫血?jiǎng)游锏募?xì)胞內(nèi)寄生蟲(chóng)，在大自然中作為一個(gè)人獸共患病原菌廣泛的存在。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全世界大約有三分之一的人類慢性感染弓形蟲(chóng)病。疾病的患病率和感染的來(lái)源在不同的地理區(qū)域各不相同，與不同的氣候、飲食習(xí)慣和衛(wèi)生狀況等有關(guān)。弓形蟲(chóng)眼病是弓形蟲(chóng)對(duì)眼組織的損害所引發(fā)的疾病，國(guó)內(nèi)目前對(duì)該病認(rèn)識(shí)較少，弓形

2、蟲(chóng)感染導(dǎo)致的弓形蟲(chóng)眼病的發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚，相關(guān)的基礎(chǔ)研究更是罕見(jiàn)。國(guó)外對(duì)該病的研究，大多集中在對(duì)本病急性感染的研究，而對(duì)于慢性感染研究較少。慢性感染弓形蟲(chóng)眼病后，眼底改變?nèi)绾伟l(fā)展和演變，臨床醫(yī)師對(duì)于本病的了解有限，所以，找到一個(gè)良好的方法建立弓形蟲(chóng)眼病慢性感染模型，能夠很好的觀察眼底變化，從而為弓形蟲(chóng)眼病的診斷與治療提供一定的依據(jù)，研究擬通過(guò)口服感染的方法建立弓形蟲(chóng)眼病的小鼠模型，模擬小鼠弓形蟲(chóng)慢性感染過(guò)程，并觀察其眼和病理改變，為

3、進(jìn)一步研究提供一定的依據(jù)。
　　研究目的:
　　建立弓形蟲(chóng)眼病的小鼠模型并觀察其眼底改變和病理特征，為進(jìn)一步研究弓形蟲(chóng)眼病的發(fā)病機(jī)制，制定弓形蟲(chóng)眼病的早期干預(yù)措施提供一定依據(jù)。
　　研究方法:
　　將20只BALB/C小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組10只和實(shí)驗(yàn)組10只，實(shí)驗(yàn)組小鼠經(jīng)口給予Ⅱ型弓形蟲(chóng)PRU蟲(chóng)株（弱毒株）包囊，模擬弓形蟲(chóng)慢性感染過(guò)程，每天觀察小鼠眼底情況，在1個(gè)月后，2個(gè)月后，3個(gè)月后分別給兩組小鼠做眼底照相以及

4、眼底熒光素血管造影，觀察小鼠眼底改變，3個(gè)月后ELISA法檢測(cè)小鼠血清IgG，然后處死小鼠取眼球做石蠟切片，HE染色和免疫組化染色后觀察視網(wǎng)膜及脈絡(luò)膜損害情況。
　　研究結(jié)果
　　實(shí)驗(yàn)組小鼠兩周后即可觀察到眼底出現(xiàn)明顯炎癥表現(xiàn)，視盤(pán)邊界不清，視網(wǎng)膜血管充盈，視網(wǎng)膜水腫、出血，由視盤(pán)區(qū)開(kāi)始逐漸向周邊血管擴(kuò)展，并隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸加重。眼底熒光素血管造影顯示實(shí)驗(yàn)組小鼠視網(wǎng)膜靜脈充盈擴(kuò)張熒光素著色，毛細(xì)血管網(wǎng)破壞，熒光素滲漏，并見(jiàn)血管

5、無(wú)灌注區(qū)，并隨時(shí)間延長(zhǎng)，逐漸加重，血清IgG出現(xiàn)明顯高滴度變化，顯著高于對(duì)照組(p＜0.001)，視網(wǎng)膜及脈絡(luò)膜組織切片，可見(jiàn)視網(wǎng)膜及脈絡(luò)膜明顯出現(xiàn)水腫改變，組織間間隙明顯疏松，有腔隙形成，視網(wǎng)膜及脈絡(luò)膜組織可見(jiàn)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，在實(shí)驗(yàn)組小鼠的視網(wǎng)膜組織切片中，發(fā)現(xiàn)了特異性染色的弓形蟲(chóng)包囊。
　　研究結(jié)論:
　　通過(guò)經(jīng)口給予Ⅱ型弓形蟲(chóng)PRU蟲(chóng)株可以建立小鼠弓形蟲(chóng)眼病模型，證明了獲得性弓形蟲(chóng)病也可以引起視網(wǎng)膜血管充盈，視網(wǎng)膜水腫、