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文檔簡介
1、目的:新生兒對病原微生物高度易感,膿毒癥發(fā)病率及病死率高。固有免疫是機體抵御病原體感染的第一道防線,固有免疫細(xì)胞通過模式識別受體(PRRs)不僅能夠識別外源性病原菌相關(guān)分子模式(PAMPs),而且能夠識別內(nèi)源性損傷相關(guān)分子模式(DAMPs),從而啟動機體免疫應(yīng)答;S100A8/A9蛋白分子是由S100A8和S100A9構(gòu)成的異二聚體,選擇性表達于中性粒細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞等固有免疫細(xì)胞,目前發(fā)現(xiàn)其在感染性疾病中有著復(fù)雜的生物學(xué)功能。本課題
2、通過建立新生大鼠膿毒癥模型來分析S100A8/A9在肺、肝組織中的表達以及炎癥因子TNF-ɑ、IL-6水平的變化,探討S100A8/A9在新生大鼠膿毒癥發(fā)病機制中的作用,從而為膿毒癥免疫干預(yù)提供新思路。
方法:采用Sprague-Dawley(SD)7日齡大鼠36只腹腔注射脂多糖(LPS)300ug/Kg建立膿毒癥模型實驗組;同樣 Sprague-Dawley(SD)7日齡大鼠36只腹腔注射等量生理鹽水建立對照組。兩組新生大鼠
3、按照隨機原則分別于注射后2、4、8、12、24、48 h收集肺臟、肝臟并保存,每個時間點均為6只SD大鼠。用Real-time PCR方法檢測肺臟和肝臟S100A8、S100A9、TNF-ɑ、IL-6的mRNA水平,免疫組織化學(xué)分析的方法檢測肺組織、肝組織S100A8/A9蛋白分子的表達。
結(jié)果:1. Real-time PCR結(jié)果顯示,與對照組相比,膿毒癥組新生大鼠肝組織和肺組織中S100A8、S100A9、TNF-ɑ的mR
4、NA水平均明顯升高,且變化趨勢類似。S100A8于2小時開始增加(P<0.01),至8小時左右達高峰,一直維持較高水平至48小時;S100A9于2小時開始升高(P<0.01),12于小時左右達高峰,至48小時有所下降,但仍高于對照組;TNF-ɑ于2小時開始升高(P<0.01),并逐步增高至12小時,48小時仍維持較高水平;2、Real-time PCR結(jié)果顯示,與對照組相比,膿毒癥組肺臟組織IL-6于4小時表達明顯升高(P<0.01),
5、8小時出現(xiàn)高峰,48小時表達仍高于對照組;肝臟組織IL-6于4小時表達明顯升高(P<0.01),12小時出現(xiàn)高峰,48小時表達仍維持較高表達水平。3、免疫組化結(jié)果顯示,在膿毒癥組肝肺組織中S100A8/A9異二聚體2小時表達明顯增多(P<0.01),24小時左右達高峰,48小時仍維持高表達水平。
結(jié)論:1、新生大鼠膿毒癥發(fā)病過程中,隨著病情進展,肺、肝組織炎癥損傷明顯加重,促炎因子TNF-ɑ、IL-6的表達增加,證明炎癥損傷是
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