宮頸惡性腫瘤患者保留生育功能的腹式根治性宮頸切除術及術前淋巴結轉移相關microRNA的研究.pdf

1、第一部分宮頸惡性腫瘤患者保留生育功能的腹式根治性宮頸切除術
　　 1.1、宮頸癌保留生育功能的腹式根治性宮頸切除術--一項潛在獲益人群的研究
　　 目的：研究早期宮頸癌患者中，適合行保留生育功能的腹式根治性宮頸切除術(ART)的患者比例。
　　 方法：我們回顧性地查閱了2000年1月到2007年12月，腹式根治性宮頸切除術尚未在復旦大學附屬腫瘤醫(yī)院廣泛開展前，因浸潤性宮頸癌在我院行根治性子宮切除術的患者病歷。根據

2、我院行根治性宮頸切除術的指征，研究適合行腹式根治性宮頸切除術的潛在患者人群。
　　 結果：經篩選，2000年1月到2007年12月期間共有3220名患者因為浸潤性宮頸癌在我院行根治性子宮切除術。其中1638名患者年齡不大于45歲。根據我院行根治性宮頸切除術的標準，653(39.87％)名患者初步符合行腹式根治性宮頸切除術的FIGO分期、腫瘤大小和病理類型，但其中49名患者因最終病理提示腫瘤播散可能需要放棄保留生育功能的手術。我們

3、的研究最終確定604名(36.87％)患者可能適合接受ART手術。
　　 結論：不大于45歲的宮頸癌患者中，有相當一定比例的人群符合腹式根治性宮頸切除術的指征。這部分患者如能在術前充分告知手術的風險和利益，將有可能接受腹式根治性宮頸切除術，在治療腫瘤的同時保留生育功能。
　　 1.2、宮頸惡性腫瘤保留生育功能的腹式根治性宮頸切除術：107名患者的手術學、腫瘤學和生育結果
　　 目的：報道在宮頸惡性腫瘤患者中開展保

4、留生育功能的腹式根治性宮頸切除術的經驗，探討患者接受這一手術后的腫瘤學、手術學結果，研究影響患者生育結果的因素。
　　 方法：從2004年4月到2012年3月，前瞻性地入組因“宮頸惡性腫瘤”在復旦大學附屬腫瘤醫(yī)院婦科行保留生育功能的腹式根治性宮頸切除術的患者。研究組患者的臨床病理資料予以詳細記錄和分析。術后對患者進行長期隨訪。為明確影響患者生育結果的因素，術后定期向患者進行電話及信件形式的問卷調查。
　　 結果：107名

5、宮頸惡性腫瘤患者計劃行保留生育功能的腹式根治性宮頸切除術。三名患者因術中快速冰凍提示病理高危因素而轉行根治性子宮切除術。研究組患者平均年齡28.3歲(范圍：11-42歲)。患者腫瘤的組織病理類型包括：11例(10.58％)腺癌、83例(79.81％)鱗癌、4例(3.85％)腺鱗癌以及6例(5.77％)宮頸橫紋肌葡萄簇肉瘤。平均淋巴結切除數目為25枚(范圍：12-53枚)。18名(17。31％)患者因病理高危因素接受術后輔助治療。66名I

6、B1期宮頸癌患者中26例腫瘤最大徑>2cm。研究組患者隨訪至今僅一例復發(fā)，中位隨訪時間26.2個月(0.5-94個月)。唯一的復發(fā)病例為一名IB1期腫瘤2cm的宮頸鱗癌患者，術中冰凍病理提示淋巴結陰性，最終石蠟病理提示右盆腔淋巴結一枚轉移，腫瘤侵犯深肌層及淋巴脈管間隙。患者術后拒絕接受輔助放療，僅接受四療程輔助化療。術后5個月隨訪CT發(fā)現肝臟多發(fā)轉移結節(jié)。手術開展初期5名(4.81％)患者在術后出現宮頸管狹窄。改良手術、向患者宮腔置入帶

7、尾絲的T型宮內節(jié)育器后，沒有患者出現術后宮頸管狹窄。48名患者完成了生育結果影響因素調查?；诟鞣N原因，手術患者中僅12人嘗試懷孕，其中四人成功受孕(三名自然受孕，一名借助輔助生育技術受孕)。三名患者在孕39周經剖宮產順利產下健康嬰兒，另一名患者尚在懷孕中。
　　 結論：我們的研究顯示，對于宮頸腫瘤不大于4cm的患者，由有經驗的婦科腫瘤?？漆t(yī)師實施腹式根治性宮頸切除術是一項切實可行的治療選擇。這一手術最主要的圍手術期并發(fā)癥為術后

8、宮頸管狹窄。術中向患者宮腔置入帶尾絲的T型宮內節(jié)育器能有效預防術后宮頸管狹窄的發(fā)生。社會因素、家庭因素以及生理因素均在很大程度上影響了患者的生育結果。術后患者的生活質量和生育問題值得進一步深入研究。
　　 1.3兒童及青少年宮頸葡萄簇橫紋肌肉瘤保留生育功能的手術治療
　　 背景：宮頸橫紋肌肉瘤多發(fā)生于兒童和青少年，是一種非常少見的惡性腫瘤。以往多采用盆腔除臟術和化放療結合的激進的治療方法進行治療。
　　 目的：探

9、討這類患者接受保育手術的適應證以及合適的手術方法，觀察患者治療后的預后和發(fā)育情況，為這一罕見腫瘤的治療提供我們的經驗
　　 方法：自2006年8月至2012年3月，所有至復旦大學附屬腫瘤醫(yī)院婦科就診的“宮頸葡萄簇橫紋肌肉瘤”患者治療前經過全面的婦科體檢及常規(guī)檢查。用于初次診斷的腫瘤活檢或腫瘤切除組織均經?？撇±磲t(yī)師進一步復片確診。每位患者根據IRS的橫紋肌肉瘤分類分期標準進行分期?；颊咝g前行胸部、盆腔以及腹腔MRI和/或CT檢查

10、以評估是否適合接受保留生育功能的手術。選擇合適的“宮頸葡萄簇橫紋肌肉瘤”病例行保留生育功能的手術。所有研究組患者的臨床病理資料予以詳細記錄和分析。術后對患者進行長期隨訪。
　　 結果：共有七例兒童及青少年宮頸葡萄簇橫紋肌肉瘤患者接受了保留生育功能的手術。除第一例患者接受宮頸錐切+子宮內膜診刮+處女膜修補手術之外，其余六例患者均接受腹式根治性宮頸切除術+盆腔淋巴結活檢術。研究組中患者平均年齡14.1歲(范圍：11-19歲)，平均隨

11、訪時間28.7個月(范圍：7-67個月)。至今7名患者無一例復發(fā)，均在治療后獲得正常月經周期并發(fā)育良好。
　　 結論：選擇合適的宮頸葡萄簇橫紋肌肉瘤病例接受保留生育功能的手術，可以獲得較好的治療效果。腹式根治性宮頸切除術+盆腔淋巴結活檢術作為保育手術的一種，與單純的息肉切除術等其他微創(chuàng)性保育手術相比，具備更好的腫瘤局控率。由有經驗的婦科腫瘤醫(yī)師開展腹式根治性宮頸切除術，術中保留子宮動脈，可以保證子宮卵巢獲得足夠的血供，從而有利于

12、兒童和青少年患者的生理發(fā)育。
　　 第二部分宮頸癌患者術前淋巴結轉移相關microRNA的研究
　　 目的：篩查宮頸癌淋巴結轉移相關的microRNA，在宮頸癌細胞株中驗證microRNA與細胞侵襲轉移能力間的關系。為進一步深入研究宮頸癌淋巴結轉移的調控機制，最終采用microRNA作為宮頸癌淋巴結轉移的標志物打下基礎。
　　 方法：選擇“有淋巴結轉移的宮頸癌原發(fā)灶新鮮凍存組織標本8例”和“無淋巴結轉移的宮頸癌原

13、發(fā)灶新鮮凍存組織標本9例”，使用Ambion mirVana RNAisolation kit提取樣本的RNA，采用基因芯片比較篩選兩組標本的差異microRNA。為排除生物個體背景差異，另取7名有淋巴結轉移患者的宮頸原發(fā)灶以及同一患者的轉移淋巴結標本(共7對14例標本)，Ambion mirVana RNA isolation kit提取樣本的RNA，采用基因芯片比較篩選兩組標本的差異microRNA。在宮頸鱗癌細胞株中轉染篩選出的差

14、異microRNA的mimic，transwell實驗比較轉染前后腫瘤細胞轉移能力變化。
　　 結果：8例“伴有淋巴結轉移的宮頸癌原發(fā)灶新鮮凍存組織標本”和9例“無淋巴結轉移的宮頸癌原發(fā)灶新鮮凍存組織”經Ambion mirVana RNA isolation kit提取RNA，Agilent2100 Bioanalyzer電泳檢測提取RNA合格；Agilent miRNAComplete Labeling and Hyb Ki

15、t分析miRNA表達譜，采用配對t檢驗統計分析。統計分析后獲得7個共同的差異基因：has-miR-142-3p，has-miR-196b，has-miR-320b，has-miR-424，has-miR-550a，has-miR-652，has-miR-H18。7名自身對照研究患者的“宮頸原發(fā)灶”和“自身轉移淋巴結”標本經基因芯片篩選、配對t檢驗分析差異基因后，發(fā)現三個共同的差異表達的miRNA(has-miR-630，has-miR-

16、223和has-miR-451)具統計意義。將has-miR-652的mimic轉染宮頸癌Caski細胞株，transwell轉移實驗顯示Caski細胞株的轉移能力較轉染前顯著增強。
　　 結論：“伴有淋巴結轉移的宮頸癌原發(fā)灶標本”和“無淋巴結轉移的宮頸癌原發(fā)灶標本”中has-miR-142-3p，has-miR-196b，hasomiR-320b，has-miR-424，has-miR-550a，has-miR-652，has