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文檔簡介
1、背景:瑪咖(Lepidium meyenii Walp., Maca)為十字花科(Brassicaceae)獨行菜屬(Lepidium)一年生或兩年生草本植物,原產(chǎn)于秘魯4000a4500 m的安第斯山區(qū),長期以來被當?shù)赝林水斪魇卟撕捅=∷幬锸秤?,素有‘秘魯人參’的美譽?,F(xiàn)代藥理學(xué)研究證明,瑪咖具有改善性功能、提高生育能力、增強免疫力、抗疲勞、預(yù)防骨質(zhì)疏松、改善更年期綜合癥等多種功效,因此得到各國消費者的青睞。由于受限于原產(chǎn)地土地資源
2、和種植技術(shù)的影響,瑪咖的產(chǎn)量遠遠無法滿足消費者的消費需求,聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)建議世界各國推廣對瑪咖的種植,將瑪咖作為重要營養(yǎng)食品進行推廣,我國自20世紀90年代開始在云南、新疆、西藏、吉林等地進行引種,以期開發(fā)出功能更全面的保健產(chǎn)品。目前,關(guān)于瑪咖的化學(xué)成分和生物活性研究已有報道,成分研究表明瑪咖主要有生物堿、芥子油苷、異硫氰酸酯、瑪咖酰胺、瑪咖烯、甾醇等次生代謝產(chǎn)物,生物活性研究大多以其粗提取物的形式為主,但對瑪咖中某單一組份所
3、對應(yīng)的生物活性尚缺乏系統(tǒng)研究。為了更好地研究瑪咖藥理作用的機理,為了進一步闡明其有效成分,加強瑪咖藥材資源的開發(fā)利用與質(zhì)量控制,本文對鶴慶產(chǎn)瑪咖乙醇提取物的化學(xué)成分進行系統(tǒng)研究,并利用高效液相色譜(HPLC)對16批不同產(chǎn)地、色型的瑪咖進行HPLC特征指紋圖譜研究。
目的:通過對鶴慶產(chǎn)瑪咖乙醇提取物的化學(xué)成分展開系統(tǒng)的研究,進一步明確其藥效物質(zhì)基礎(chǔ),尋找新的活性成分資源,深入開展對瑪咖的專屬性對照物質(zhì)的研究。同時利用HPLC技
4、術(shù)對國內(nèi)不同產(chǎn)地、色型的瑪咖進行指紋圖譜研究,為瑪咖的質(zhì)量標準控制提供可行的實驗依據(jù)。
方法:⑴采用MCI大孔吸附樹脂、正相硅膠色譜、反相硅膠色譜、SephadexLH-20色譜、半制備HPLC柱色譜以及重結(jié)晶等方法,對鶴慶產(chǎn)瑪咖的石油醚萃取部位和正丁醇萃取部位進行分離純化,并根據(jù)理化性質(zhì)、光譜數(shù)據(jù)分析(UV、IR、1D,2D-NMR、MS)、高效液相色譜法等方法,分別鑒定所純化的單體化合物。⑵對收集自全國各地的16批次瑪咖進
5、行HPLC指紋圖譜研究,優(yōu)化了色譜條件為:Shimadzu LC-20AD型高效液相色譜儀,紫外檢測器,Inertsil C18柱(5μm,4.6×150 mm),流動相A:0.5%磷酸水溶液,流動相B:乙腈,采用二元梯度洗脫程序;流速:1.0 mL?min-1;檢測波長220 nm;柱溫30℃;進樣量10μL。
結(jié)果:①共分離得到18個化合物,分別鑒定為:macaolidine(1),色氨酸(2),胡蘿卜苷(3),(3S)-
6、1,2,3,4-四氫-β-卡波林-3-羧酸(4),綠原酸(5),木犀草素(6),金絲桃苷(7),芹菜素(8),棕櫚酸(9),琥珀酸(10),β-谷甾醇(11),N-芐基十七碳酰胺(12),N-(3-甲氧基-芐基)-十六碳酰胺(13),十六烷酸環(huán)氧乙烷基甲酯(14),苯甲胺(15),monasfluore B(16),macaridine(17),對二甲氨基苯甲酸(18)。②16批次瑪咖藥材共標定了13個共有指紋特征峰,對特征指紋圖譜進行
7、相似度計算和聚類分析,結(jié)果顯示16批樣品的相似度均在0.9以上,最高相似度達到0.998。其方法學(xué)考察結(jié)果和指紋圖譜評價結(jié)果,均符合國家中藥指紋圖譜的標準,說明本試驗建立的瑪咖藥材HPLC指紋圖譜共有模式能比較真實全面的反映反應(yīng)瑪咖的特征。
結(jié)論:⑴在天然產(chǎn)物中分離得到的酰胺類生物堿,化合物4、14、16為從瑪咖中分離得到的化合物。⑵通過單因素考察對瑪咖藥材的提取工藝進行優(yōu)化,確定了最佳色譜條件,構(gòu)建了16批瑪咖藥材的HPLC
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