重度子癇前期胎盤組織中MicroRNA的表達譜研究.pdf

1、目的:
　　子癇前期是一種多因素多基因性疾病，目前國內(nèi)外關于基因的研究熱點趨向于miRNA對靶基因轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控，本研究詣在篩選重度子癇前期與正常妊娠胎盤組織中差異表達的miRNA譜，并分析部分microRNA與重度子癇前期的關系。
　　方法:
　　1、收集2011年10月至2012年4月在江西省婦幼保健院行剖宮產(chǎn)分娩的6例重度子癇前期和5例正常妊娠的胎盤組織。
　　2、液氮研缽Trizol法提取總RNA，用紫

2、外分光光度儀測定法和甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳法檢測總RNA的濃度、OD值、純度和質(zhì)量。
　　3、采用miRNA標記試劑盒miRCURYTM Array Power Labeling Kit標記樣本RNA，與第7代Exiqon miRCURY LNATM(V18.0)版本（包括3100個捕獲探針，覆蓋miRBase數(shù)據(jù)庫18.0版本人、小鼠、大鼠三種物種全部miRNAs，同時覆蓋與上述三種物種相關的所有病毒的miRNAs）雜交并洗滌后

3、用Axon Genepix4000B芯片掃描儀掃描。用Genepix pro V6.0進行原始數(shù)據(jù)分析并用MEV軟件進行差異miRNA表達篩選（以P值＜0.05和Fold change值≥1.5或≤0.5為條件）及聚類分析。
　　結(jié)果:
　　1、microRNA芯片結(jié)果的聚類分析顯示:重度子癇前期與正常妊娠胎盤組織共存在60個差異表達的miRNAs，且60個miRNAs在重度子癇前期胎盤組織中表達顯著上調(diào)。
　　2、其

4、中miR-451已證實在重度子癇前期胎盤組織中顯著差異表達，除此之外，本研究新發(fā)現(xiàn)一些異常表達的miRNAs如miR-767，miR-203，miR-25，miR-218等。
　　結(jié)論:
　　microRNA芯片可以快速高通量分析重度子癇前期胎盤組織相關的miRNA表達譜，通過miRNA芯片篩選出差異表達的miRNA有可能成為新的重度子癇前期特征性的生物學標志物，并可進一步認識和研究其在重度子癇前期發(fā)生發(fā)展中的作用，為尋找臨