血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C基因應(yīng)用的前期研究.pdf

1、山東大學(xué)博士學(xué)位論文血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C基因應(yīng)用的前期研究姓名：高杰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：人體解剖學(xué)與組織胚胎學(xué)指導(dǎo)教師：劉執(zhí)玉2002.5.16出丕盔堂盟主蘭嬉絲噩一——腦血管系統(tǒng)疾病和有關(guān)腫瘤的基因治療研究中，并己取得顯著成果，某些發(fā)達(dá)國(guó)家己i 耖( ～期臨床實(shí)驗(yàn)階段，而V E G F —c 基因的應(yīng)用研究尚處于起步階段。f自1 9 9 9 年起，本課題組針對(duì)V E G F —C 在腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移中的生物學(xué)功能及其應(yīng)用等方面開始了?系

2、列的研究。為了探討V G E ／。C 存淋巴管乍成和調(diào)節(jié)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞過(guò)程中的作用機(jī)制，探索抑制腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移的新方法，并進(jìn)一步應(yīng)用V E G F —c 基因治療某些淋巴管形成缺陷性疾病，我們?cè)O(shè)計(jì)并完成了三部分的系列實(shí)驗(yàn)。第一部分：V E G F - C 在人乳腺癌細(xì)胞株中的表達(dá)| 方法：、I ．培養(yǎng)人乳腺癌細(xì)胞株M D A ．M B 一2 3 1 ( 低分化) 、M C F 一7 ( 高分化)和阿霉素耐藥株M C F 一7 ／A d r

3、 。2 ．應(yīng)用免疫組織化學(xué)S A B C 方法檢測(cè)V E G F ．C 在七述三種細(xì)胞中的定位、定性表達(dá)。3 ．運(yùn)用I P P 圖像分析系統(tǒng)對(duì)免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析處理，以陰性對(duì)照組細(xì)胞的平均密度均數(shù)為測(cè)量下限，測(cè)量實(shí)驗(yàn)組陽(yáng)性細(xì)胞的平均密度，并求其均數(shù)，以衡量v E G F ．C 的定量表達(dá)情況。4 ．運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)t 檢驗(yàn)方法，比較V E G F —C 在M D A —M B 一2 3 1 與M C F 一7 和M C F 一7 與

4、M C F ～7 ／A d r 中的表達(dá)量差異情況。結(jié)果：1 ．免疫組化檢測(cè)發(fā)現(xiàn)M D A ～i V l B 一2 3 1 、M C F 一7 和M C F 一7 ／A d r 三種細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中均有V E G F —c 的陽(yáng)性棕黃色顆粒，而陰性對(duì)照細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中均無(wú)陽(yáng)性顆粒。2 ．運(yùn)用[ P P 圖像分析系統(tǒng)處理免疫組化染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)：M D A - M B 一2 3 1 、M C F 一7 和M c F 一7 ／A d r 陰性對(duì)照細(xì)