人CD59活性位點短肽封條的抗腫瘤效應的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的 本研究旨在通過噬菌體展示技術尋找與腫瘤逃逸相關的CD59活性位點，研制特異性針對CD59活性位點的短肽封條，觀測其封閉或干擾效應，為腫瘤的靶向免疫治療開辟一條新途徑。 方法 采用噬菌體隨機十二肽庫展示技術對Hela細胞裂解蛋白及層析純化后的CHO細胞的裂解蛋白進行5輪親和淘洗篩選；從篩選后的噬菌體庫中分別隨機挑選15/16個噬菌體克隆進行測序，并對隨機挑選的噬菌體克隆與野生型M13噬菌體進行競爭結合實驗；經

2、序列分析找出共享序列并推斷其相應的氨基酸位點，同時與CD59活性區(qū)域進行分析比對，找出人CD59分子的活性位點，并合成短肽封條，觀測其封閉效應。 結果 經過5輪全細胞篩選后，兩種噬菌體庫的回收量均可達到10<'7>～10<'8>數量級，且競爭結合分析及細胞特異性結合分析顯示篩選后的噬菌體克隆及噬菌體庫對兩種細胞蛋白均具有明顯的特異性結合效應。通過測序結果推斷出Hela細胞表面CD59的多肽序列(-ACHWPWCHGC-)

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