安心顆粒誘導(dǎo)大鼠心肌梗死模型血管新生的蛋白表達(dá)的研究.pdf

1、本研究分為二部分：
　　第一部分、急性心肌梗死模型的復(fù)制
　　目的:對大鼠心肌梗死模型建立的討論。
　　方法:將75只PDF級SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組10只、常規(guī)模型組65只,將模型組大鼠麻醉后固定在鼠臺上,用多導(dǎo)生理儀與大鼠連接后記錄肢導(dǎo)心電圖,經(jīng)口氣管插管后連接小動物呼吸機(jī),將大鼠胸腔打開顯露心臟,在左心耳與肺動脈圓椎之間距主動脈起點2~3mm處,以左冠狀靜脈為標(biāo)志,結(jié)扎冠狀動脈左前降支;假手術(shù)組用上述方法開胸顯露

2、心臟,但是只做穿線工作,一個月后查看動物存活率、蘇木素一伊紅(HE)染色光鏡下觀察心肌組織病理變化、Western-Blot方法檢測梗死心肌eNOS,P-AKT蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:模型組動物成活率65％,病理切片可見缺血梗死區(qū)的心肌細(xì)胞排列不齊,肌細(xì)胞數(shù)量減少,細(xì)胞核大小不甚規(guī)則,細(xì)胞分界不清楚;梗死區(qū)心肌及梗死心肌邊緣區(qū)p-AKT、p-eNOS蛋白表達(dá)水平顯著增加。
　　結(jié)論:此方法制備動物模型簡單易得,且動物存活率比較

3、高,對于研究大鼠心肌梗死模型血管新生的蛋白表達(dá)起到了積極作用。
　　第二部分、安心顆粒誘導(dǎo)大鼠心肌梗死模型血管新生的蛋白表達(dá)的研究
　　目的:對安心顆粒誘導(dǎo)大鼠心肌梗死模型血管新生蛋白表達(dá)的研究。
　　方法:將造模用的65只SD大鼠隨機(jī)分成6組,每組10只,留5只作為備用。標(biāo)記為假手術(shù)組、生理鹽水組、麝香保心丸組、安心顆粒小、中、大劑量組,用3％戊巴比妥鈉(0.1ml/100g)將大鼠麻醉后固定于鼠臺,將其與多導(dǎo)生理儀

4、連接以便于記錄肢體導(dǎo)聯(lián)心電圖,行氣管插管術(shù)后連接動物呼吸機(jī),在大鼠左胸第4~5肋處開胸顯露心臟,在左心耳與肺動脈圓椎之間距主動脈起點2~3mm處,以左冠狀靜脈為標(biāo)志,結(jié)扎冠狀動脈左前降支制備大鼠心肌梗死模型,假手術(shù)組用上述方法開胸顯露心臟后,只做穿線工作。術(shù)后當(dāng)天始每天注射青霉素針1次(20萬u/100g體重)預(yù)防感染,共3天。灌胃8周后,查看動物存活率,用HE染色和免疫組化觀察安心顆粒對實驗動物心肌梗死邊緣區(qū)心肌微血管數(shù)(MVC)、微

5、血管密度(MVD)的影響;Wstern-Blotting測定安心顆粒對實驗動物心肌P-eNOS,p-akt蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果:安心顆粒各劑量組與麝香保心丸組及對照組相比較,其心肌梗死邊緣區(qū)的平均微血管數(shù)(MVC)、平均微血管密度(MVD)均明顯增多,差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01);安心顆粒各劑量組和對照組和麝香保心丸組相比較,梗死區(qū)心肌 eNOS,P-AKT蛋白表達(dá)均明顯增加,差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.0