冬瓜子活性成分研究.pdf

1、冬瓜子是一味傳統(tǒng)中藥。為了充分發(fā)揮我國(guó)冬瓜資源豐富，且其具有防治慢性炎癥的優(yōu)勢(shì)，本論文對(duì)冬瓜子的化學(xué)成分以及在防治慢性炎癥的作用方面進(jìn)行了較深入地研究。
　　為了明確冬瓜子所含成分的化學(xué)組成，本研究采用系統(tǒng)預(yù)測(cè)與系統(tǒng)分離的方法，根據(jù)冬瓜子中各成分的性質(zhì)差異，利用顯色反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等化學(xué)方法進(jìn)行分類研究，得出其主要含有大量油脂、皂苷及甾醇三大類化合物。然后分別進(jìn)行如下研究:
　　(1)以油脂的得率及感官特征為指標(biāo)，采用回流提取

2、法、索氏提取法、超聲波提取法對(duì)其油脂提取工藝進(jìn)行對(duì)比研究，研究得出索氏提取法提取效果較好。然后，采用正交試驗(yàn)對(duì)其工藝參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化。研究得出，在操作參數(shù)為:液料比12、提取時(shí)間2h，提取溫度80℃時(shí)，冬瓜子油的得率較高，可達(dá)16％。最后，采用氣相-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)對(duì)本工藝條件下所得油脂進(jìn)行成分測(cè)定。檢定分析出化合物共18種，其主要成分為不飽和脂肪酸，含量為85.88％，不飽和脂肪酸中亞油酸含量最高，為80.91％。
　　

3、(2)以甾醇的得率為指標(biāo)，采用Liebermann-Burchard比色法進(jìn)行含量監(jiān)控，對(duì)皂化法提取冬瓜子油中植物甾醇的工藝進(jìn)行研究。研究在單因素的基礎(chǔ)上，通過(guò)響應(yīng)面法優(yōu)化出的工藝條件為:液料比8、提取時(shí)間3h、提取溫度82℃、皂化液濃度2.5mol/L、皂化時(shí)間1h、皂化溫度94℃。按此工藝，冬瓜子油中植物甾醇的得率為608.8μg/g。經(jīng)高效液相色譜測(cè)定儀(HPLC)檢測(cè)其純度為96.9％;經(jīng)GC-MS測(cè)定，檢定分析出不同結(jié)構(gòu)的植物

4、甾醇共8種。
　　(3)以皂苷得率為指標(biāo)，采用AcidAnhydride-ConcentratedSulfuricAcid比色法進(jìn)行含量監(jiān)控，對(duì)溶劑浸提法提取冬瓜子皂苷進(jìn)行工藝研究。研究在單因素的基礎(chǔ)上，通過(guò)正交優(yōu)化出的工藝條件為:液料比13、提取時(shí)間2.5h、提取溫度80℃、乙醇濃度75％。工藝穩(wěn)定性試驗(yàn)，RSD為0.0174。按此工藝，冬瓜子皂苷的得率為0.85％。;經(jīng)薄層色譜法(TLC)分析，在不同極性的展開系統(tǒng)中，均為單個(gè)

5、斑點(diǎn);經(jīng)HPLC檢測(cè)其純度為93.8％。
　　為了明確冬瓜子中起抗慢性炎癥的活性成分及其作用效果，本研究采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的方法進(jìn)行體內(nèi)抗炎試驗(yàn)研究。研究以冬瓜子油、冬瓜子皂苷、冬瓜子甾醇為試驗(yàn)藥物，以醋酸潑尼松為陽(yáng)性對(duì)照，以檢測(cè)降低二甲苯所致小鼠耳廓、甲醛所致小鼠足的腫脹程度，小鼠毛細(xì)血管通透性的影響為試驗(yàn)效應(yīng)指標(biāo)。通過(guò)與陽(yáng)性藥物比較得出:本試驗(yàn)方法正確，結(jié)果可靠;且冬瓜甾醇和冬瓜皂苷的抗炎效果均較好，但油脂組的作用效果不顯著。通過(guò)與