PI-9在胃癌表達的意義及與GrB表達關(guān)系的初步研究.pdf

1、研究背景和目的:細胞免疫在機體抗腫瘤免疫應(yīng)答中發(fā)揮主要作用,其效應(yīng)細胞主要為活化的細胞毒T淋巴細胞(Cytotoxic Tlymphocytes,CTL)和自然殺傷細胞(Nature killer cell,NK),它們可通過穿孔素(perforin,PFP)／顆粒酶B(granzymeB,GrB)介導(dǎo)的細胞毒途徑和Fas／Fas-L介導(dǎo)的細胞凋亡途徑發(fā)揮作用,其中PFP／GrB介導(dǎo)的細胞毒作用是主要途徑。GrB是CTL和NK細胞中含量

2、最豐富、發(fā)揮細胞毒作用最快且有效的顆粒酶,是主要的效應(yīng)分子,能快速誘導(dǎo)靶細胞凋亡。近年來的研究發(fā)現(xiàn),CTL和NK細胞間不會因釋放GrB而相互攻擊,其因為在于CTL和NK細胞自身可表達一種GrB蛋白酶特異抑制劑,即絲氨酸蛋白酶抑制劑-9(serine proteinaseinhibitor9,PI-9),防止被自身的顆粒酶或相互之間釋放的顆粒酶攻擊,而形成自我保護,即內(nèi)源性免疫逃逸機制。
　　 我們先前的研究發(fā)現(xiàn),GrB在胃良惡性

3、上皮細胞有表達[1],由此我們推測胃良惡性上皮細胞是否類似于CTL和NK細胞,亦有PI-9表達而具有內(nèi)源性免疫逃逸機制,形成一種自我保護能力,逃避了細胞毒T淋巴細胞的免疫殺傷作用,從而有利于腫瘤的發(fā)生、發(fā)展?
　　 本研究旨在探討胃良惡性細胞是否亦具有細胞毒淋巴細胞類似的主動免疫逃逸分子機制,從而成為免疫豁免細胞。其意義在于揭示腫瘤細胞是否具有內(nèi)在的主動免疫逃逸這一全新機制提供初步的實驗依據(jù)。研究內(nèi)容分為兩部分:在第一部分,觀察

4、PI-9在良惡性胃上皮細胞是否有表達,其表達變化規(guī)律并探討其臨床生物學(xué)意義。在第二部分,主要觀察GrB在胃癌細胞中的表達及其與PI-9表達的相互關(guān)系。旨在揭示胃癌細胞是否與細胞毒T淋巴細胞一樣,也存在PI-9與GrB組成式共表達關(guān)系。
　　 方法:選取術(shù)前未進行放療、化療及免疫治療,經(jīng)外科行胃癌根治性或姑息性切除術(shù)后患者標(biāo)本35例,收集其相應(yīng)完整的臨床及病理學(xué)資料。采用免疫組織化學(xué)SP法檢測切緣上皮、癌旁上皮、癌細胞及相應(yīng)淋巴結(jié)

5、轉(zhuǎn)移胃癌細胞中PI-9表達情況和GrB在胃癌細胞中的表達,主要探討其在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的作用并分析其與臨床病理因素之間的關(guān)系與預(yù)后價值。
　　 結(jié)果:第一部分:1.PI-9在切緣上皮、癌旁上皮、癌細胞中均發(fā)現(xiàn)有PI-9表達,陽性率分別是80.00％、65.71％、42.86％,切緣上皮、癌旁上皮與癌細胞之間有差異(P<0.05),切緣與癌旁上皮細胞之間無顯著差異(P>0.05)；2.胃癌細胞中PI-9的表達與患者臨床分期及淋巴結(jié)

6、轉(zhuǎn)移兩組之間差異顯著(P<0.05),與年齡、性別、組織分化及浸潤深度無差異(P>0.05)；3.在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌細胞中有PI-9表達,陽性表達率為47.83％,相應(yīng)的原發(fā)癌中PI-9表達率為26.07％,兩者之間無差異(P>0.05)。第二部分:1.在胃癌上皮細胞中有GrB表達,陽性率是48.57％。2.35例標(biāo)本中顯示在胃癌上皮細胞中PI-9和GrB有陽性表達,PI9+&GrB+表達的胃癌占25.71％,PI9-&GrB-表達占34

7、.29％,同步率60.00％；PI9+&GrB-表達的胃癌占17.14％,PI9-&GrB+占22.86％,非同步率40.00％,其中PI9-&GrB-在胃癌上皮細胞中的表達與PI9+&GrB-。差異顯著(P<0.05)。3.PI9+&GrB+、PI9-&GrB-、PI9+&GrB-及PI9-&GrB+在浸潤深度及淋巴轉(zhuǎn)移差異顯著(P<0.05)；進一步兩兩比較發(fā)現(xiàn):PI9+&GrB+與PI9+&GrB-在浸潤程度淺組差異顯著(P<0.

8、05)；在浸潤程度淺、臨床分期早組PI9+&GrB+與PI9-&GrB+有顯著差異(P<0.05)；PI9-&GrB-與PI9+&GrB-在浸潤程度深、臨床分期晚及有淋巴轉(zhuǎn)移組差異顯著(P<0.05)。
　　 結(jié)論:1.本研究顯示在人體切緣、癌旁、胃癌上皮細胞及其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌細胞中發(fā)現(xiàn)有PI-9表達,初步證實我們的推測。PI-9對胃癌生物學(xué)行為的影響尚需更進一步的研究。2.GrB在胃癌中確有表達與PI-9表達有一定同步性,但未