2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(Glucose transporters,GLUTs)是細(xì)胞攝取葡萄糖的主要載體,目前已知的八種葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白中以葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(GLUT-1)分布最廣,研究最多。目前研究發(fā)現(xiàn)GLUT-1在多種腫瘤中存在異常高表達(dá),與惡性腫瘤細(xì)胞異常增殖密切相關(guān),被認(rèn)為是一個(gè)腫瘤增殖相關(guān)基因。本實(shí)驗(yàn)旨在探討GLUT-1在胰腺癌組織標(biāo)本中的表達(dá)及臨床意義,研究GLUT-1在胰腺癌細(xì)胞株中的表達(dá)及對(duì)胰腺癌細(xì)胞增殖的影響。
 

2、 方法:⑴利用免疫組織化學(xué)法(IHC)檢測(cè)GLUT-1在53對(duì)胰腺癌組織和相應(yīng)癌旁組織中的表達(dá),并分析 GLUT-1的表達(dá)與臨床病理因素及胰腺癌患者生存預(yù)后的關(guān)系;⑵正電子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層顯像(PET-CT)檢測(cè)胰腺癌患者18F-脫氧葡萄糖(18F-FDG)的攝取值,免疫組化檢測(cè)Ki-67在胰腺癌組織及癌旁組織中的表達(dá)水平,分析GLUT-1的表達(dá)與18F-FDG攝取值及Ki-67表達(dá)之間的相關(guān)性;⑶利用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶聯(lián)反應(yīng)(RT-PCR)和

3、Western blot檢測(cè)GLUT-1在胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1、Patu-8988、BxPC3、SW1990中的表達(dá)情況,將siRNA-GLUT-1轉(zhuǎn)染到胰腺癌細(xì)胞株中,并對(duì)轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞株進(jìn)行嘌呤霉素陽(yáng)性篩選,利用RT-PCR和Western blot確認(rèn)RNAi靶向沉默GLUT-1的效果;⑷沉默GLUT-1表達(dá)后,利用體外增殖實(shí)驗(yàn)(CCK-8法)、18F-FDG結(jié)合率檢測(cè),細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期檢測(cè),研究GLUT-1與胰腺癌細(xì)胞體外生

4、長(zhǎng)增殖的關(guān)系。
  結(jié)果:①GLUT-1在胰腺癌組織中的陽(yáng)性率明顯高于癌旁組織,兩者陽(yáng)性表達(dá)率分別為73.6%和20.6%(P<0.05);GLUT-1的表達(dá)與臨床病理因素的分析結(jié)果顯示,GLUT-1的表達(dá)與腫瘤大小、腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P<0.05),而與性別、年齡、腫瘤部位、分化程度、血管侵犯無(wú)明顯相關(guān)(P>0.05),胰腺癌患者生存期多因素分析顯示GLUT-1是胰腺癌患者生存期的獨(dú)立危險(xiǎn)因素之一。②GLUT-1陽(yáng)性

5、胰腺癌患者檢測(cè)SUVmax值中位數(shù)值為5.19,25%-75%范圍:4.97-8.18,GLUT-1陰性胰腺癌患者檢測(cè) SUVmax值中位數(shù)值為2.95,25%-75%范圍:2.43-3.97(P<0.05);Spearman分析表明SUVmax值與GLUT-1表達(dá)呈正相關(guān)性(r=0.6885,P<0.001)。③RT-PCR和Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示,GLUT-1在細(xì)胞株P(guān)ANC-1、Patu8988、SW1990、BxP

6、C3中都高表達(dá),通過(guò) Western blot檢測(cè)四株胰腺癌細(xì)胞 PANC-1、Patu8988、SW1990、BxPC3中 GLUT-1/β-actin的蛋白相對(duì)灰度比值分別為0.894±0.013、0.851±0.029、0.812±0.035、0.785±0.041,RNAi技術(shù)沉默GLUT-1在PANC-1和Patu8988中的表達(dá),蛋白抑制率分別為84.6%、87.7%。④沉默GLUT-1在PANC-1和Patu8988中的表

7、達(dá)后,PANC-1和Patu8988細(xì)胞18F-FDG攝取值明顯降低(P<0.05 P<0.05),增殖能力明顯降低(P<0.05,P<0.05),細(xì)胞凋亡增加( P<0.05 P<0.05),細(xì)胞周期檢測(cè)結(jié)果顯示PANC-1細(xì)胞和Patu8988細(xì)胞的G0/G1期細(xì)胞數(shù)均明顯增多(P<0.05, P<0.05),PANC-1細(xì)胞中G2/M期細(xì)胞數(shù)減少(P<0.05),而Patu8988細(xì)胞中S期細(xì)胞數(shù)減少(P<0.05)。
  

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