Fasudil對(duì)實(shí)驗(yàn)性免疫性小鼠肝損傷肝組織中RhoA、FoxP3及RORrt的影響.pdf

1、【目的】研究Fasudil對(duì)實(shí)驗(yàn)性免疫性小鼠肝損傷肝組織中RhoA、FoxP3及RORrt的影響。
　　【方法】①24只雌性昆明小鼠隨機(jī)分成3組,分別為正常對(duì)照組、模型組、干預(yù)組三組。按照下列方法尾靜脈注射:首先予以正常對(duì)照組及模型組生理鹽水(15mg/kg)注射;15min后,模型組以刀豆蛋白A(ConA)(20mg/kg)注射,正常對(duì)照組以等體積生理鹽水注射;干預(yù)組首先以RhoA信號(hào)通路特異性的阻斷劑法蘇地爾(Fasudil)

2、(15mg/kg)進(jìn)行預(yù)處理后,15min后再尾靜脈注射ConA(20mg/kg)。②8小時(shí)后腹腔麻醉小鼠,心臟取血,離心,留取血清用以測(cè)量肝功能(ALT、AST)。③RT-PCR檢測(cè)肝組織中RhoA、Foxp3、核孤兒受體(RORrt)的mRNA表達(dá)水平。④Western-blot法檢測(cè)RhoA、ROCK-1的蛋白水平。
　　【結(jié)果】①模型組小鼠肝酶水平(ALT、AST)顯著高于正常對(duì)照組及干預(yù)組,經(jīng)阻斷RhoA信號(hào)通路后的干預(yù)

3、組肝酶水平與正常對(duì)照組無(wú)顯著差異;②干預(yù)組RhoA的mRNA水平及蛋白表達(dá)水平均最高,模型組次之,正常對(duì)照組水平最低,三者之間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=19.81,P<0.001)。③ROCK-1的蛋白水平模型組最高,正常對(duì)照組與干預(yù)組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。④RORrt的mRNA表達(dá)水平模型組最高,干預(yù)組次之,正常對(duì)照組最低,三者之間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=10.462,P=0.001)。模型組Foxp3mRNA水平顯著低于正常對(duì)照組和干預(yù)組(P<0.0