油茶果實生長發(fā)育的性狀研究.pdf

1、油茶(Camellia oleifera Abel.)是中國特有的木本油料樹種,與油棕、油橄欖和椰子并稱為世界四大木本食用油料植物。茶油被譽為“東方橄欖油”,是高級的烹調食用油,也是醫(yī)藥和化妝品等的新興原料。油茶籽的含油量(粗脂肪含量)與其胚胎的發(fā)育、種子成熟過程中,油體在種子子葉細胞的發(fā)育與積累密切相關。本研究以油茶高油品系“贛石83-2”為研究對象,采用石蠟切片方法、番紅-固綠雙重染色法相結合,對其胚胎發(fā)育過程進行了觀察研究;采用冰

2、凍切片方法、尼羅紅染色與激光掃描共聚焦顯微技術(LSCM)相結合,觀察油茶種子發(fā)育過程子葉細胞油體的形成特點及油脂分布、不同含油量種子子葉細胞的油體大小及截面積,探討種子含油量與種子子葉細胞內油體的相互關系;同時研究了油茶發(fā)育過程中,果實理化特性指標的變化及與含油量的相關性,探討油茶種子內油脂的形成機理。主要研究結果如下:
　　1.油茶胚胎發(fā)育階段及對應的時間段依次為球形胚(29~33 WAF)、心形胚(33~38 WAF)、魚雷

3、形胚(38~41 WAF)、成熟胚(41~54 WAF)。胚乳的發(fā)育為初生胚乳核直接開始分裂,出現(xiàn)游離核,并形成胼胝質壁(1~25 WAF),核型胚乳細胞充滿整個胚囊腔(25~29 WAF),出現(xiàn)極薄的膜分開,多邊形、較大,細胞核小而成解體狀而被胚吸收(29~41 WAF),最后完全消失(41~54 WAF)。依據種子成熟中可溶性糖含量、蛋白質含量、含油量在不同采樣時期表現(xiàn)出的變化特點,將種子成熟過程劃分為成熟前期、成熟中期和成熟后期三

4、個階段。
　　2.建立和優(yōu)化了基于 LSCM研究油茶子葉細胞油體的方法。具體方法為:FAA固定15 h、冰凍切片、尼羅紅染色、PBS緩沖液漂洗、制片、封片、LSCM觀察,其中切片厚度為25μm,尼羅紅染液的濃度為10μg?mL-1,染色時間為15 min。采用此法觀察到油茶油體平均直徑為2.52±1.99μm。
　　3.對不同含油量品系油茶子葉細胞油體的細胞分布觀察發(fā)現(xiàn),含油量越高的油茶品系,細胞染色越深,細胞內油體排列更緊

5、密,油體數量越多,并集中堆疊分布于細胞中央,不與細胞壁接觸,油體邊緣清晰;含油量越低的品系細胞染色越淺,細胞內油體或分布于細胞壁邊緣,或稀疏分散于細胞內,油體數量越少且不連續(xù)。表明油茶種子子葉細胞中油體數量、截面積之和與種子含油量間存在顯著正相關。觀察發(fā)育中的子葉細胞油體發(fā)現(xiàn),油體形成于細胞邊緣,隨著油脂合成、積累和含油量的升高,油體增多,且慢慢集中于細胞中央,排布越緊密。
　　4.油茶果實的心室數為3或4,有20個左右的胚珠,隨

6、著果實的發(fā)育,多數胚珠退化,僅余1~6個最終發(fā)育為成熟飽滿的種子;油茶果實在發(fā)育過程中果形由橄欖形變成卵形,果皮色歷青色、青黃色、最后成為紅黃色;油茶果實質量的增長存在三個高峰期:35~40 WAF(6月中旬~7月下旬)、42~46 WAF(8月上旬~9月上旬)、48~53 WAF(9月中旬~10月中下旬)。
　　5.研究結果表明,在種子發(fā)育過程中(41~54 WAF)種子含油量與油茶果實、種子各物化特性指標存在相關性,其中干籽含