漳州水仙鱗莖盤轉(zhuǎn)錄組分析及類黃酮合成途徑基因的表達(dá).pdf

1、中國水仙（Narcissus tazetta var. chinensis）為石蒜科水仙屬多花水仙類的多年生草本植物，水仙品種較少，顏色單一，改良中國水仙花色一直以來都是廣大研究者對(duì)水仙的研究重點(diǎn)之一。本研究以漳州水仙為材料，通過對(duì)不同器官色素顯色分析及原花青素定性分析、水仙鱗莖盤轉(zhuǎn)錄組測(cè)序以及qPCR分析類黃酮合成途徑結(jié)構(gòu)基因和調(diào)控因子的表達(dá)，探討漳州水仙類黃酮途徑不同分支的生物合成及其分子基礎(chǔ)。本研究主要獲得以下研究成果：
　

2、　1.漳州水仙中的主要類黃酮物質(zhì)為黃酮醇和原花青素。水仙花瓣和副冠部位主要成分是黃酮醇，鱗莖盤中主要成分原花青素，且原花青素單體為兒茶素。水仙花瓣和副冠中沒有檢測(cè)到原花青素和花青素，這可能是導(dǎo)致水仙花顏色單一的主要原因之一。
　　2.以水仙鱗莖盤為材料，提取RNA，基于Illumina平臺(tái)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序，此次測(cè)序共獲得4,934,557,168bp數(shù)據(jù)量，其中reads數(shù)24,430,849條。組裝出36,006個(gè)unigene，

3、 unigene平均讀長(zhǎng)706bp，N50讀長(zhǎng)1,084，超過500的的unigene有16,059個(gè)，從而構(gòu)建了水仙鱗莖盤轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫。
　　3.通過Blast數(shù)據(jù)庫比對(duì)、序列分析、系統(tǒng)進(jìn)化樹等方法，篩選和確認(rèn)漳州水仙中類黃酮生物合成相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因和調(diào)控因子，共獲得4個(gè)NtCHS、2個(gè)NtCHI、3個(gè)NtF3H、3個(gè)NtUFGT、2個(gè)NtMYB以及NtF3’H、NtDFR、NtLAR、NtbHLH和NtWD40各一個(gè)基因，在數(shù)據(jù)

4、庫中，沒有發(fā)現(xiàn)原花青素途徑關(guān)鍵基因ANR及花青素途徑關(guān)鍵基因ANS。
　　4.通過qPCR技術(shù)對(duì)水仙鱗莖盤轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫中刪選得到的類黃酮合成相關(guān)10個(gè)基因的共19個(gè)家族成員在漳州水仙全開期、半開期和花蕾期三個(gè)時(shí)期的花瓣與副冠以及葉片和鱗莖盤中的表達(dá)模式進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，含有多個(gè)基因的家族基因都表現(xiàn)出不同的表達(dá)模式；NtLAR在水仙鱗莖盤部位高表達(dá)，NtFLS在水仙花瓣與副冠中高表達(dá)，與這兩部分器官中類黃酮的成分相吻合；NtMYB