生物法耦合膜技術(shù)制備甘草次酸的研究.pdf

1、本文采用生物發(fā)酵法耦合膜分離技術(shù)制備甘草次酸。建立了對甘草次酸的檢測方法，對微生物搖瓶培養(yǎng)、種子罐發(fā)酵工藝及發(fā)酵罐轉(zhuǎn)化工藝進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，對分離膜的選型，膜除雜濃縮工藝路線的確定和甘草次酸的精制進(jìn)行了全面的探討。 1.建立了甘草酸和甘草次酸的高效液相色譜同步檢測方法，并確定了色譜條件。分析甘草次酸的相關(guān)系數(shù)R2=0.999983，重現(xiàn)性實驗標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.00088，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.00061％。該方法準(zhǔn)確度高，可靠性強(qiáng)。

2、 2.以甘草酸的轉(zhuǎn)化率為指標(biāo)，確定了微生物搖瓶培養(yǎng)、種子罐發(fā)酵、20L發(fā)酵罐轉(zhuǎn)化及200L擴(kuò)大發(fā)酵轉(zhuǎn)化的各項工藝參數(shù)。采用這些工藝參數(shù)進(jìn)行實驗，搖瓶培養(yǎng)甘草酸轉(zhuǎn)化率可達(dá)到78.62％，種子罐發(fā)酵獲得的生物量比搖瓶培養(yǎng)高出33％，20L發(fā)酵甘草酸轉(zhuǎn)化率高達(dá)77.34％，200L發(fā)酵甘草酸轉(zhuǎn)化率也可達(dá)到74.72％。 3.對甘草次酸發(fā)酵液膜除雜、濃縮工藝進(jìn)行了研究，討論了不同分離膜對發(fā)酵液除雜、濃縮的效果。發(fā)現(xiàn)超濾膜I對發(fā)酵液中

3、蛋白質(zhì)和固形物的去除率高，納濾膜II對甘草次酸的濃縮效果較好。并確定了采用超濾膜I除雜-納濾膜II濃縮二級膜工藝作為發(fā)酵產(chǎn)物甘草次酸的膜除雜濃縮工藝。 4.對甘草次酸的精制進(jìn)行了研究，確定了甘草次酸的精制預(yù)處理工藝及各項參數(shù)。選用苯乙烯型D101非極性大孔吸附樹脂對甘草次酸進(jìn)行純化，并找到了最佳洗脫方案。經(jīng)過預(yù)處理后，可以獲得純度為97.50％的甘草次酸。而經(jīng)過大孔吸附樹脂的吸附和洗脫后，能夠獲得純度高達(dá)98.97％的甘草次酸成