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文檔簡介
1、自體脂肪組織因分布廣、組織相容性好、獲取時供區(qū)損傷小等優(yōu)勢成為理想的軟組織重建材料,但在應(yīng)用中存在脂肪移植存活不穩(wěn)定,并發(fā)癥多等問題。尤其在乳房這一特殊受區(qū),脂肪移植量大,其應(yīng)用備受爭議。 第一部分研究是評估乳房受區(qū)移植脂肪臨床轉(zhuǎn)歸情況,探討并發(fā)癥的診斷治療方法。包括修復(fù)效果、脂肪壞死與囊性化等并發(fā)癥的發(fā)生情況,鉬靶、超聲、磁共振影像特點(diǎn),與乳房包塊的鑒別等。本文第二部分研究,是在建立脂肪移植動物模型基礎(chǔ)上,探討人脂肪來源干細(xì)胞
2、(Adipose-DerivedStemCells,以下簡稱ADSC細(xì)胞)輔助移植方法對移植脂肪顆粒存活的促進(jìn)作用。 研究一:乳房受區(qū)自體脂肪顆粒移植的臨床轉(zhuǎn)歸研究 目的:評估自體脂肪移植治療乳房軟組織體積不足的手術(shù)效果;了解移植后脂肪壞死、囊性化等并發(fā)癥的發(fā)生情況,以及它們的鉬靶、超聲、磁共振影像特點(diǎn),特別是與乳房惡性包塊的鑒別;探討并發(fā)癥的診斷治療方法。 方法: 本組66例,年齡20-39歲。包括,隆
3、胸假體取出術(shù)后乳房變形患者17例,乳房良性腫瘤切除術(shù)后7例,乳房整形術(shù)后6例,乳房下垂萎縮患者19例,小乳癥27例(其中隆胸后因心理排斥在沒有任何并發(fā)癥的情況下要求取出假體的患者8例)。采用Du-5-10MHz超聲檢查考察移植脂肪液化情況;采用乳房鉬靶檢查考察乳房脂肪液化囊腫形成及鈣化情況;采用核磁共振檢查考察囊腫性質(zhì)。對2例要求乳房再次整形患者進(jìn)行液化脂肪囊腫摘除手術(shù)。 結(jié)果: 隨訪時間13-61個月。11例在術(shù)后體檢
4、發(fā)現(xiàn)乳房結(jié)節(jié),乳房攝片有圓形或類圓形的低密度影,有完整囊壁包裹,部分伴囊壁粗顆粒鈣化,影像診斷為移植脂肪液化囊腫,其中病理證實有3例。液化脂肪囊腫在術(shù)后1-36個月發(fā)現(xiàn),直徑為3mm~23mm,在鉬靶中呈現(xiàn)薄壁低密度類圓形影,厚壁加鈣化低密度類圓形,粗顆粒點(diǎn)狀鈣化等表現(xiàn)類型,未發(fā)現(xiàn)有毛刺狀、集簇狀細(xì)顆粒鈣化或組織變形等惡性包塊特征。 結(jié)論: 對于先天、后天外傷或醫(yī)源性的乳房軟組織不足病例,自體脂肪顆粒移植具有脂肪來源廣、
5、易獲取、無免疫排斥的優(yōu)點(diǎn)。但因存在囊鐘、鈣化等并發(fā)癥可能,其臨床指征需從嚴(yán)掌握,相關(guān)治療技術(shù)和方法尚待進(jìn)一步完善。 研究二:ADSCs細(xì)胞輔助脂肪顆粒移植的實驗研究 目的:建立標(biāo)準(zhǔn)的脂肪顆粒移植動物模型,探討人脂肪來源干細(xì)胞(Adipose-DerivedStemCells,以下簡稱ADSCs細(xì)胞)輔助移植方法,對移植脂肪顆粒存活的促進(jìn)作用。 方法: (1)建立脂肪移植動物模型:獲取同一個體人脂肪來源脂肪
6、顆粒,按0.05ml、0.1ml、0.5ml、1.0ml分組移植,120天后取材觀察受區(qū)成活的移植脂肪組織厚度,脂肪壞死情況及其它并發(fā)癥情況。 (2)ADSCs細(xì)胞的獲?。喊幢菊n題組脂肪顆粒移植相關(guān)參數(shù)[30]獲取篩選脂肪顆粒組織,取20ml待移植,取400ml參照Zuk[48]的酶消化法獲取ADSCs細(xì)胞。 (3)分組實驗:實驗組取200ml脂肪顆粒組織來源的ADSCs細(xì)胞與10ml顆粒脂肪混合,對照組不加ADSCs。
7、兩組脂肪分別移植至裸鼠皮下。移植后120天取材,組織行石蠟包埋,HE染色。SPSS11.0軟件,方差分析的兩兩比較比較兩組間鏡下皮下移植脂肪存活厚度的差異。 (4)取200ml顆粒組織來源的ADSCs細(xì)胞行原代培養(yǎng),觀察細(xì)胞形態(tài)及功能變化。取第3代細(xì)胞進(jìn)行體外成脂及內(nèi)皮分化誘導(dǎo),油紅o染色、PPARmRNAPCR檢測及CD31細(xì)胞免疫熒光檢測鑒定。 結(jié)果: (1)動物模型:0.05ml,0.1ml,0.5ml,1
8、ml組每組12個標(biāo)本出現(xiàn)壞死脂肪囊腫的標(biāo)本數(shù)分別為0、1、11、12個。確定后續(xù)實驗中采用0.5ml移植量/點(diǎn)的動物模型。 (2)移植后120天取材,實驗組皮下移植脂肪存活厚度為1.77±0.05mm,較對照組(1.013±0.04mm)增加,(P<0.05)。實驗組移植脂肪組織壞死融合較少,空泡較少,纖維囊壁及移植組織內(nèi)有較多微血管出現(xiàn)。 (3)細(xì)胞培養(yǎng)及鑒定:原代培養(yǎng)的ADSCs細(xì)胞形態(tài)類似于成纖維細(xì)胞,具有較強(qiáng)的增
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