DDAH基因多態(tài)性調(diào)控ADMA與慢性腎臟病關(guān)系的臨床研究.pdf

1、背景非對(duì)稱性二甲基精氨酸(asymmetrical dimethylarginine,ADMA)是一種甲基化精氨酸,可通過抑制一氧化氮合酶(nitric oxidesynthesis,NOS)活性,使一氧化氮(nitric oxide,NO)合成減少,導(dǎo)致血管內(nèi)皮功能障礙。二甲基精氨酸二甲胺水解酶(dimethylargininedimethylaminohydrolase,DDAH)是ADMA的主要代謝酶,對(duì)調(diào)節(jié)體內(nèi)ADMA水平起著重

2、要作用。DDAH減少或活性降低可使ADMA在體內(nèi)蓄積。DDAH/ADMA/NO對(duì)血管內(nèi)皮功能的影響是否與慢性腎臟病(chronic kidney disease,CKD)的發(fā)生發(fā)展有關(guān)有待于進(jìn)一步的研究。
　　目的：1.比較血漿ADMA在對(duì)照組及CKD不同分組的濃度,闡述ADMA與CKD發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性。2.分析DDAH2(-449 G/C)、DDAH2(-1151 A/C)不同基因型及等位基因在對(duì)照組及CKD不同分組的分布頻率。

3、3.檢測DDAH2(-449 G/C)、DDAH2(-1151 A/C)不同基因型分布頻率與血漿ADMA水平的關(guān)系,探討DDAH2(-449 G/C)、DDAH2(-1151 A/C)基因多態(tài)性對(duì)血漿ADMA濃度的影響。4.分析DDAH2(-449 G/C)與DDAH2(-1151 A/C)基因多態(tài)性交互作用對(duì)血漿GFR及ADMA濃度的影響作用。
　　方法：1.選擇CKD患者(排除已行腎臟替代治療、高血壓腎病、糖尿病腎病和狼瘡性腎

4、病)186例為CKD組;血尿檢查無異常,既往無慢性疾病患者102例為對(duì)照組。CKD組按2001年美國腎臟病基金會(huì)公布的eGFR分為5期。2.運(yùn)用高效液相色譜(high performance liquid chromatography,HPLC)檢測血漿ADMA水平。3.運(yùn)用聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction-restriction,PCR)、限制性內(nèi)切酶片段長度多態(tài)性法(restriction fragm

5、ent lengthpolymorphisma,RFLP)檢測DDAH2(-449 G/C)基因多態(tài)性。4.運(yùn)用基因測序法檢測DDAH2(-1151 A/C)基因多態(tài)性。5.運(yùn)用spss13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果：1.采用logistic回歸逐步后退法對(duì)性別、年齡等因素進(jìn)行多因素分析,探討CKD的可能危險(xiǎn)因素,結(jié)果顯示,ADMA是CKD的危險(xiǎn)因素之一(OR>1)。2.CKD組血漿ADMA濃度明顯高于對(duì)照組,兩者比較有

6、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。隨著疾病進(jìn)展,血漿ADMA濃度依次增加,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。3.CKD組DDAH2(-449 C/G)基因型及等位基因分布頻率與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),表明DDAH2(-449 C/G)基因多態(tài)性與CKD的發(fā)生有相關(guān)性。CKD組DDAH2(-449 C/G)G等位基因頻率高于對(duì)照組(P<0.05)。在DDAH2(-449 C/G)為CC,CG,GG基因型時(shí),血漿ADMA濃度總體及兩兩

7、比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。4.CKD組DDAH2(-1151 A/C)基因型及等位基因分布頻率與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),表明DDAH2(-1151 A/C)基因多態(tài)性與CKD的發(fā)生有相關(guān)性。CKD組DDAH2(-1151 A/C)A等位基因頻率高于對(duì)照組(P<0.05)。在DDAH2(-1151 A/C)為AA,AC,CC基因型時(shí),血漿ADMA濃度總體比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。兩兩比較DDAH2(-1

8、151 A/C)CC基因型與AA、AC基因型ADMA濃度有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。5.DDAH2(-449 G/C)基因型與DDAH2(-1151 A/C)基因型對(duì)血漿GFR及ADMA濃度存在交互作用。其中DDAH2(-449 G/C)為GC基因型與DDAH2(-1151 A/C)為CC基因型的組合GFR值最大(123.758±32.413)ml/min/1.73m~2,DDAH2(-449 G/C)為GG基因型與DDAH2(-11

9、51 A/C)為AA基因型的組合GFR值最小(46.297±50.492)ml/min/1.73m~2。DDAH2(-449 G/C)為GG基因型與DDAH2(-1151 A/C)為AA基因型的組合ADMA值最大(0.905±0.399)μmol/L,DDAH2(-449 G/C)為GG基因型與DDAH2(-1151 A/C)為CC基因型的組合ADMA值最小(0.452±0.252)μmol/L。
　　結(jié)論：1.ADMA是CKD的

10、危險(xiǎn)因素之一,與慢性腎臟疾病發(fā)生發(fā)展相關(guān)。隨著腎功能的進(jìn)展,血漿ADMA濃度升高。2.DDAH2(-449 G/C)、DDAH2(-1151 C/A)基因多態(tài)性與CKD的發(fā)生有關(guān)。DDAH2(-449 C/G)G等位基因、DDAH2(-1151 A/C)A等位基因可能是CKD的易感因素。3.DDAH2(-449 G/C)、DDAH2(-1151 A/C)基因多態(tài)性對(duì)血漿ADMA濃度具有影響作用。4.DDAH2(-449 G/C)基因多態(tài)