產(chǎn)酶溶桿菌OH11胞外多糖合成相關(guān)基因的克隆及其與生物膜形成的關(guān)系.pdf_第1頁(yè)
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1、利用質(zhì)粒pSC137（含CmR的mariner轉(zhuǎn)座子）對(duì)OH11進(jìn)行轉(zhuǎn)座誘變，成功構(gòu)建了Lysobacter enzymogenes OH11的轉(zhuǎn)座子插入文庫(kù)。通過表型篩選，從5000個(gè)接合子中篩選到2個(gè)胞外多糖突變株OE1和048和1個(gè)脂多糖突變株OE3.在MM平板上，OE1和OE3菌落干燥，邊緣皺縮；048菌落粘性增加。利用任意PCR技術(shù)，快速鑒定了OE1、OE3和048中轉(zhuǎn)座子的插入位點(diǎn)。序列分析表明，在OE3中，轉(zhuǎn)座子插入到了A

2、BC(ATP-Binding Cassette)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的關(guān)鍵基因中，該基因編碼一個(gè)Permease蛋白。在048中，轉(zhuǎn)座子插入到TypeⅣ泌出系統(tǒng)的關(guān)鍵基因中，該基因編碼一個(gè)Pilin蛋白。在OE1中，轉(zhuǎn)座子插入的基因在公共數(shù)據(jù)庫(kù)中沒有同源基因，提示該基因可能是L．enzymogenes特有的胞外多糖合成相關(guān)基因。生物膜試驗(yàn)表明，OE3能正常形成生物膜，而OE1和048形成生物膜的能力顯著降低，同野生型相比，OE1和048形成生物膜的

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