多西紫杉醇長循環(huán)脂質(zhì)體治療胰腺癌的研究.pdf

1、目的：多西紫杉醇作為新一代的紫杉類抗癌藥物，是微管解聚抑制劑，其作用于微管/微管蛋白系統(tǒng)，通過促進微管雙聚體裝配成微管，且通過防止去多聚化過程而使微管穩(wěn)定，阻滯細胞于 G2和 M期，從而抑制癌細胞的有絲分裂和增殖。經(jīng)過多年的臨床研究顯示，對胰腺癌有較好的療效，其單藥有效率達29％。本文制備多西紫杉醇長循環(huán)脂質(zhì)體，并對制備的長循環(huán)脂質(zhì)體性質(zhì)進行評價，通過病理及免疫組化等方法對胰腺癌原位模型進行分析。
　　方法：①以蛋黃磷脂、膽固醇、

2、DSPE-PEG2000為膜材，利用薄膜分散法將多西紫杉醇包封入類脂質(zhì)雙分子層中而形成的一種具有封閉囊泡結(jié)果的超微型球狀體，應(yīng)用透射電鏡、粒徑儀、HPLC等分析手段對產(chǎn)物進行表征；
　　②荷Luc轉(zhuǎn)基因胰腺腫瘤模型的建立。首先成功構(gòu)建Luc報告基因轉(zhuǎn)染的胰腺癌細胞株，然后利用經(jīng)螢火蟲熒光素酶(Luciferase)報告基因標記的人胰腺癌細胞PANC-1luc體外傳代培養(yǎng)，經(jīng)0.25%胰酶消化制成細胞懸液，將5×106（0.2 ml

3、）的細胞懸液接種于16只重量為20 g左右的BALB/c裸鼠右側(cè)頸背部皮下；
　　③原位模型的建立：使用氯胺酮腹腔內(nèi)麻醉裸鼠，左上腹直腸旁線處行1 cm的縱行切口，仔細分開胃和脾之間的薄膜，暴露胰腺，使用1 ml注射器，0.6 mm注射針頭將5×106（0.2 ml）的細胞懸液注入胰頭近脾的門脈處，將胰腺輕輕送回腹腔，6-0號外科縫線縫合腹壁肌層及皮膚，即制成胰腺癌原位模型。1周內(nèi)傷口完全愈合并無感染并且無死亡現(xiàn)象，表明胰腺癌原位

4、模型可行性較好；
　?、芟葘⑽灮鹣x發(fā)光底物注入裸鼠麻腹腔內(nèi)后利用氯胺酮麻醉通過活體生物成像系統(tǒng)監(jiān)測生物體內(nèi)的細胞活動和基因行為，能夠直接快速地測量原位模型中腫瘤細胞的生長和轉(zhuǎn)移，并可對治療中腫瘤細胞的變化進行實時觀測和評估。
　　結(jié)果：①多西紫杉醇長循環(huán)靶向脂質(zhì)體包封率為87%、粒徑85.87 nm、電位-0.271 mV、粒徑分布均勻；②胰腺癌細胞經(jīng)轉(zhuǎn)染后可在4周左右，側(cè)脊背處觸及不同程度大小的包塊，質(zhì)硬、邊界清楚、無滑動

5、感；③MTT法結(jié)果顯示，多西紫杉醇長循環(huán)脂質(zhì)體能夠很好地抑制 PANC-1Luc細胞的增長。應(yīng)用多西紫杉醇、長循環(huán)脂質(zhì)體和生理鹽水治療后發(fā)現(xiàn)，多西紫杉醇長循環(huán)脂質(zhì)體組裸鼠腫瘤生長遲緩，腫瘤體積較多西紫杉醇組和對照組減小，統(tǒng)計學(xué)檢驗與其他兩組間有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。
　　結(jié)論：多西紫杉醇長循環(huán)脂質(zhì)體治療胰腺癌原位模型的研究：脂質(zhì)體是將藥物包封于類脂質(zhì)雙分子層內(nèi)而形成的微型囊泡，它是一種定向藥物載體，屬于靶向給藥系統(tǒng)的一種新劑