逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的分泌性人核糖核酸酶抑制因子對(duì)小鼠黑色素瘤基因治療的研究.pdf

1、大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的分泌性人核糖核酸酶抑制因子對(duì)小鼠黑色素瘤基因治療的研究姓名：盛甫秀申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：崔秀云20050601并且外源性限制血管的生成可以明顯地抑制腫瘤的生長(zhǎng)，甚至可以使腫瘤消退。因此Folkman從其開(kāi)創(chuàng)性的研究中提出假說(shuō)認(rèn)為，阻斷腫瘤的血管形成就可以阻止腫瘤的生長(zhǎng)。至今為止，已有很多的血管阻斷劑被發(fā)現(xiàn)。但應(yīng)用這些阻斷劑～個(gè)明顯的不足是需要高濃度的阻斷劑才可以有效

2、地抑制腫瘤的生長(zhǎng)，而這些阻斷劑又因?yàn)閺?fù)雜的提取過(guò)程，在應(yīng)用上受到限制。基因治療可以在一定程度上解決這個(gè)問(wèn)題。所謂基因治療是指，用一定的方法將外源基因?qū)肽康募?xì)胞中，使之在體內(nèi)長(zhǎng)期進(jìn)行表達(dá)，從而達(dá)到治療的目的。目前，基因治療的導(dǎo)入系統(tǒng)可分為兩類(lèi)：病毒載體系統(tǒng)和非病毒載體系統(tǒng)。現(xiàn)在有相當(dāng)多的基因治療臨床項(xiàng)目是采用前者中的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體。本文所用的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLNCX有來(lái)源于鼠莫氏白血病病毒和鼠莫氏肉瘤病毒的長(zhǎng)末端重復(fù)序列(LTR)及巨細(xì)

3、胞病毒即早啟動(dòng)子(PcMv)和一個(gè)新霉素篩選標(biāo)記(neo)。該載體質(zhì)粒一旦被轉(zhuǎn)染入包裝細(xì)胞系PA317即可被其表達(dá)的逆轉(zhuǎn)錄病毒外殼蛋白所包裝，從而形成有感染力，卻復(fù)制缺陷型的逆轉(zhuǎn)錄病毒顆粒?？寡苌蓪⑹且环N抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的有效方法。動(dòng)物試驗(yàn)顯示RI能抑制動(dòng)物體內(nèi)某些移植實(shí)體瘤的生長(zhǎng)，給予荷瘤小鼠RI后可以抑制乳腺癌實(shí)體瘤Ca761，肉瘤S180，肝癌實(shí)體瘤H22，C6大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤等的生長(zhǎng)。我們以前的實(shí)驗(yàn)也顯示RI在腫瘤病人的血

4、中活性下降，并且RIrrlRNA在乳腺癌中比其在正常組織中顯著降低。RI由含有許多亮氨酸的重復(fù)順序的多肽組成，含有這樣重復(fù)順序的一百多種蛋白質(zhì)顯示了廣泛的功能，包括細(xì)胞周期調(diào)節(jié)、DNA修復(fù)、對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)相互作用以及抑制酶活性等。RI被認(rèn)為是胚胎發(fā)育、創(chuàng)傷愈合及腫瘤發(fā)生中新血管形成的一種調(diào)節(jié)因子。RI定位于染色體的llDl55，與_raS基因鄰近，在腫瘤病人中經(jīng)常存在染色體的1113155部位的變異。RI可能與細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化有關(guān)。因此，