小檗胺與紫杉醇納米微球的構(gòu)建及其體外協(xié)同抑瘤效應(yīng)評價.pdf

1、目的：探討小檗胺（Berbamine，BA）與常用化療藥物紫杉醇（Paclitaxel，PTX）聯(lián)合給藥對于人胃癌細胞株的影響；并且采用自行合成的聚己內(nèi)酯-聚乙二醇（methoxy poly（ethylene-glycol）-polycaprolactone，mPEG-PCL）二親嵌段共聚物，通過納米沉淀法，分別制備小檗胺載藥納米微球及小檗胺與紫杉醇雙藥載藥納米微球；通過考察其各項理化表征、釋放性質(zhì)以及體外協(xié)同抗腫瘤活性來明確載藥納米微

2、球在腫瘤治療中的優(yōu)勢，為這種新型的控釋納米給藥系統(tǒng)的進一步開發(fā)提供科學(xué)根據(jù)。 方法：應(yīng)用中效原理（Median-effect Principle，Chou-Talalay聯(lián)合指數(shù)法）進行統(tǒng)計分析，繪制小檗胺與紫杉醇單藥及聯(lián)合用藥對腫瘤細胞生長的劑量-效應(yīng)曲線，確定聯(lián)合用藥時對腫瘤細胞的效應(yīng)（Fa）與合用指數(shù)（CI）的關(guān)系，判定藥物間的相互作用。通過開環(huán)聚合法，制備mPEG-PCL二親嵌段共聚物，采用優(yōu)化的o/w乳化擴散/揮發(fā)法，

3、制備負載小檗胺的納米粒子；優(yōu)化制備工藝并考察載體的結(jié)構(gòu)、分子量、納米粒子的形態(tài)、粒徑分布、體外釋藥特性等性質(zhì)。以MTT法，評價載藥納米微球在體外對于胃癌細胞株MKN-28、BGC-823的協(xié)同抗腫瘤活性。 結(jié)果：第一，在一定的濃度范圍內(nèi)小檗胺單藥與紫杉醇單藥對BGC-823與MKN-28細胞均顯示出了明顯的生長抑制效果。當(dāng)將各個對應(yīng)濃度的兩藥聯(lián)合作用于胃癌細胞株時生長抑制效果進一步提高，低濃度的小檗胺與紫杉醇的協(xié)同殺傷效果明顯強

4、于高濃度下的兩藥協(xié)同效果。第二，所制備的小檗胺和紫杉醇的單藥及雙藥載藥納米粒子呈規(guī)整的球形，粒徑小于100nm，小檗胺最高載藥量為15.28％，包封率為87±3.4％。體外釋放實驗顯示，載藥粒子具有緩釋特征。熒光標記粒子的細胞攝取實驗證實，微球可通過胞吞作用進入細胞，在細胞內(nèi)釋放藥物，這是微球不同于裸藥的抗腫瘤機制。小檗胺載藥納米微球與裸藥小檗胺對于腫瘤細胞的殺傷作用相差不大，且都具有濃度以及時間依賴性。第三，小檗胺與紫杉醇雙藥載藥微球

5、的粒徑小于100nm。雙藥微球中紫杉醇的載藥量為16.9±2.1％，包封率為16.9±2.1％：而雙藥微球中小檗胺的載藥量與紫杉醇接近，為14.8±1.9％，包封率達到了84.7±7.4％。體外釋放曲線顯示雙藥微球表現(xiàn)為一個緩慢釋放的特點。由細胞生存率曲線可以見到在BGC-823細胞系上，雙藥載藥微球所造成的細胞殺傷明顯強于同樣濃度的紫杉醇單藥，顯示了小檗胺與紫杉醇被載入高分子微球后仍然具有良好的協(xié)同生長抑制效果。 結(jié)論：小檗胺