乳清蛋白降壓肽的制備及其功能研究.pdf

1、乳清是工業(yè)生產(chǎn)干酪及干酪素的副產(chǎn)品，具有豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，同時(shí)乳清蛋白中還含有大量的功能性成分。乳清蛋白肽具有ACE抑制活性、抗血栓活性等生物活性，近幾年來(lái)一直是人們的研究熱點(diǎn)。本課題是以乳清蛋白為研究對(duì)象，利用復(fù)合蛋白酶制備乳清蛋白肽，并進(jìn)行了純化及其功能性檢驗(yàn)系列研究。 本論文使用復(fù)合酶水解乳清蛋白制備乳清蛋白降壓肽，采用正交實(shí)驗(yàn)確定最佳酶解條件。分別研究了酶與底物濃度([E/S])、溫度、堿性蛋白酶和胰蛋白酶比例([E<,1

2、>/E<,2>])對(duì)ACE抑制率和水解度的影響；通過(guò)三因素三水平正交實(shí)驗(yàn)確定乳清蛋白的最佳酶解條件：[E/S]為5％，pH為8、溫度為45℃、[E<,1>/E<,2>]為5：4、水解時(shí)間150min，在此條件下乳清蛋白水解物的ACE抑制率為60.19％，水解度為11.92％。 采用超濾和離子交換樹(shù)脂對(duì)乳清蛋白肽進(jìn)行純化精制，選用6kDa聚砜類中空纖維超濾膜對(duì)乳清蛋白降壓肽進(jìn)行分離提取，研究操作溫度、操作壓力兩個(gè)因素變化對(duì)分離效果

3、影響。通過(guò)試驗(yàn)得出最佳分離條件是：溫度為25℃、壓力為0.1Pa，在此條件下超濾透過(guò)液的ACE抑制率提高了33％；選用陰、陽(yáng)離子交換樹(shù)脂對(duì)乳清蛋白水解肽和過(guò)6kDa超濾膜的透過(guò)液進(jìn)行脫鹽，結(jié)果表明在流速為50r/min條件下，乳清蛋白水解液和過(guò)6kDa超濾膜的透過(guò)液，總的氮回收率為81％以上、脫鹽率為81％以上、經(jīng)過(guò)脫鹽的乳清蛋白水解肽和過(guò)6KDa超濾膜的透過(guò)液的ACE抑制率幾乎沒(méi)有變化。 利用純化精制后的乳清蛋白水解肽飼喂原發(fā)

4、性高血壓鼠(SHR)，分別測(cè)定體重、血壓、ACE活性和臟器解剖指標(biāo)進(jìn)行功能驗(yàn)證。結(jié)果表明，乳清蛋白水解肽能降低血壓和ACE活性，與對(duì)照組相比有明顯的效果；對(duì)乳清蛋白水解肽的降血壓功能進(jìn)行12h的監(jiān)測(cè)，發(fā)現(xiàn)乳清蛋白水解肽能使血壓在第4h降到最低，隨后緩慢回升至近似原始血壓水平，結(jié)果表明，乳清蛋白水解肽的降血壓功能具有一定的穩(wěn)定性；另外對(duì)SHR進(jìn)行臟器解剖，臟器解剖指標(biāo)證明SHR存在心臟肥大癥。試驗(yàn)對(duì)SHR飼喂乳清蛋白水解肽階段體重進(jìn)行監(jiān)控