輸卵管積水對胚胎毒性及發(fā)育潛能影響的研究.pdf

1、廣州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文輸卵管積水對胚胎毒性及發(fā)育潛能影響的研究姓名：李旎申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：劉風(fēng)華20100501廣州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文輸卵管積水對胚胎毒性及發(fā)育潛能影響的研究3研究方法研究方法1不同濃度積水組中胚胎的培養(yǎng)和觀察不同濃度積水組中胚胎的培養(yǎng)和觀察收集2009年6月至2009年12月在我院生殖中心常規(guī)進(jìn)行IVFETICSIET治療的新鮮廢棄胚胎，隨機(jī)分入含有積水濃度分別為0%，20%，40%，60%，8

2、0%，100%的囊胚培養(yǎng)液，培養(yǎng)至D5~D8，每天同一時間觀察胚胎的發(fā)育情況并記錄。比較不同濃度積水組D5早期囊胚形成數(shù)、D6囊胚擴(kuò)張數(shù)、D7囊胚孵出數(shù)及各組囊胚形成總數(shù)、擴(kuò)張總數(shù)、孵出總數(shù)，了解不同濃度積水對囊胚發(fā)育速度及對各期囊胚發(fā)育情況的影響。2差異性染色法鑒定各組擴(kuò)張期囊胚質(zhì)量差異性染色法鑒定各組擴(kuò)張期囊胚質(zhì)量用兩種熒光染料Bisbenzie(Hoechst33342)和碘化丙啶(PropidiumiodidePI)，對0%~8

3、0%積水組擴(kuò)張期囊胚進(jìn)行染色并在熒光顯微鏡下拍照。分別對內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞和滋養(yǎng)層細(xì)胞計數(shù)，比較各組囊胚ICM細(xì)胞數(shù)和ICMTotal比值，從而鑒定囊胚質(zhì)量。3酶聯(lián)免疫吸附實驗測定培養(yǎng)液中酶聯(lián)免疫吸附實驗測定培養(yǎng)液中IGFⅡ和Ⅱ和EGF的濃度的濃度用酶聯(lián)免疫吸附實驗測定含不同濃度積水的胚胎培養(yǎng)液、各組囊胚擴(kuò)張期、孵出期培養(yǎng)液中IGFⅡ和EGF的濃度，酶標(biāo)儀450nm處記錄數(shù)值，每組3個復(fù)孔。4統(tǒng)計學(xué)分析統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSSl7.0fWind

4、ows軟件包進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差(xs)表示，多組之間比較采用方差分析。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果結(jié)果10%~80%濃度輸卵管積水中，D5早期囊胚形成數(shù)、D6囊胚擴(kuò)張數(shù)、D7囊胚孵出數(shù)，均無統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）；100%濃度輸卵管積水中，上述觀察指標(biāo)較0%~80%組均明顯減少，結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）；100%濃度輸卵管積水中，上述觀察指標(biāo)較0%~80%組均明顯減少，結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）