鴨傳染性漿膜炎滅活疫苗免疫產(chǎn)蛋種鴨母源抗體及其保護(hù)力.pdf

1、本研究開展了建立基于脂多糖的間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(LPS-ELISA)和基于鴨疫里默氏菌(RA)超聲裂解物的間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(PRO-ELISA)檢測血清1型鴨疫里默氏菌(RA-1)抗體、鴨傳染性漿膜炎滅活疫苗免疫產(chǎn)蛋種鴨后其種蛋卵黃及6日齡雛鴨血清中LPS-ELISA抗體/PRO-ELISA抗體/試管凝集試驗(yàn)抗體的消長規(guī)律、雛鴨母源抗體水平與抵抗RA-1強(qiáng)毒攻擊的關(guān)系評(píng)估等，獲得如下結(jié)果:
　　1、檢測RA-1抗體的LPS-

2、ELISA和PRO-ELISA方法建立
　　LPS-ELISA∶ LPS最佳包被濃度為12.50 ng/μL，血清最佳稀釋濃度為1∶800，酶標(biāo)二抗最佳稀釋度為1∶400。
　　PRO-ELISA∶ RA超聲裂解抗原最佳包被濃度為1.56 ng/μL，血清最佳稀釋濃度為1∶400，酶標(biāo)二抗最佳稀釋度為1∶800。
　　以上兩種方法與經(jīng)典的RA試管凝集試驗(yàn)具有較好的平行關(guān)系。
　　2、鴨傳染性漿膜炎滅活疫苗免疫種鴨

3、后抗體傳至卵黃及下一代6日齡雛鴨的消長規(guī)律
　　60只4月齡產(chǎn)蛋種鴨注射0.5mL鴨傳染性漿膜炎滅活疫苗，于第3、6、9、12、15、18、21、24、27、30、33、36天收集當(dāng)天所產(chǎn)的鴨蛋，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)每次收集30個(gè)，其中10個(gè)鴨蛋提取卵黃抗體，20個(gè)鴨蛋用來孵化雛鴨，每批次雛鴨孵育出來后于6日齡采集血液并分離血清，設(shè)60只4月齡產(chǎn)蛋種鴨不免疫疫苗對(duì)照。用試管凝集試驗(yàn)和兩種不同的ELISA方法檢測抗體的水平，結(jié)果表明:疫苗免疫

4、種鴨后第6天即可檢測出卵黃抗體，第27天抗體水平達(dá)到最高，第33天后抗體水平開始緩慢降低，血清抗體水平與卵黃抗體水平變化規(guī)律基本一致，但血清抗體明顯偏低，對(duì)照組呈陰性。
　　3、鴨傳染性漿膜炎滅活疫苗免疫種鴨后下一代雛鴨母源抗體消長規(guī)律與雛鴨抵抗大劑量RA-1強(qiáng)毒攻擊的保護(hù)力
　　120只4月齡產(chǎn)蛋種鴨注射0.5mL鴨傳染性漿膜炎滅活疫苗，收集免疫后第27-33天鴨蛋孵育雛鴨，設(shè)80只4月齡產(chǎn)蛋種鴨不注射疫苗為對(duì)照組。開展兩

5、項(xiàng)試驗(yàn):(1)抗體檢測:采集1、3、6、9、12、15、18、21日齡雛鴨血清，用試管凝集試驗(yàn)和兩種不同的ELISA方法檢測抗體的效價(jià);(2)攻毒保護(hù)試驗(yàn):選3、6、9、12、15、18、21日齡雛鴨，進(jìn)行攻毒，每個(gè)日齡選8只作為試驗(yàn)組，每只雛鴨肌肉注射0.5mL含菌量為109CFU/mL RA-1強(qiáng)毒;對(duì)照組每個(gè)日齡選6只雛鴨注射相同劑量菌液;空白組每個(gè)日齡選4只雛鴨注射等量生理鹽水。結(jié)果表明:雛鴨體內(nèi)母源抗體隨著日齡增長呈下降趨勢，