人食管癌Scid鼠移植瘤的建立及其生物學特性研究.pdf

1、背景和目的:
　　食管癌是世界上最常見的惡性腫瘤之一,男性食管癌的發(fā)病率在世界上居惡性腫瘤的第六位,在發(fā)展中國家為第四位,中國是世界上食管癌高發(fā)地區(qū)。對于早期有希望治愈的患者,首選手術或放射治療。由于食管癌的癥狀出現(xiàn)較腫瘤的實際進展晚,當患者有吞咽困難的食管阻塞癥狀就診時多屬中晚期癌,確診時有80％的患者已無根治性切除指證,主要靠放射治療或其它綜合治療。食管癌預后無論是外科還是放射治療都較差,治療后5年生存率一般不超過30%。食管

2、癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移非常多見,是其主要特點之一。即使癌限于黏膜下層的早期食管癌,切除標本淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移也可達40%~50%。本實驗利用人食管癌原發(fā)灶和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶的新鮮手術標本建立食管癌相應的Scid小鼠移植瘤,并對其基本生物學特性進行鑒定,對食管癌淋巴道轉(zhuǎn)移機機制進行初步的探討。為今后食管癌研究提供基本工具和平臺。
　　方法:
　　用人食管鱗癌手術新鮮標本移植于Scid小鼠皮下。原代移植成功后,于Scid小鼠間反復連續(xù)傳代。傳代相對穩(wěn)

3、定后檢測移植瘤的相關生物學特性:進行大體形態(tài)學,光鏡、電鏡、流式細胞分析周期分布和染色體分析;用免疫組化技術檢測轉(zhuǎn)移相關蛋白P53、MMP2、E-Ca、CD44、VEGF、VEGF-C、VEGFR-3、nm23、及PCAN表達情況。移植瘤組織凍存復蘇再次接種于Scid小鼠皮下,觀察致瘤情況。并每代進行體外組織原代培養(yǎng)。
　　結(jié)果:
　　從12例食管癌手術患者中取得食管癌組織移植于Scid小鼠皮下,歷時24個月,兩例獲得成功,

4、一例來自于患者食管原發(fā)灶,標記為EC-1,已經(jīng)穩(wěn)定傳代15代;另一例來自于食管癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶標記為 EC-11,已經(jīng)穩(wěn)定傳代22代;均為食管鱗癌。并對其生物學特性進行了研究,分別來自原發(fā)灶和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶移植瘤表現(xiàn)出不同的生物學特性:
　?、貳C-1潛伏期較長,平均潛伏期為20天,荷瘤成活時間長,最長荷瘤成活時間為156天;而EC-11潛伏期短,平均潛伏期為12天,荷瘤成活時間較短,最長荷瘤成活時間為65天。
　?、贓C-11

5、較EC-1生長速度快,部分有浸潤現(xiàn)象表現(xiàn)出更強的侵襲性。
　　③PCAN和P53在兩個瘤株均高表達;CD44、VEGF、VEGF-C、VEGFR-3、MMP2在EC-11中表達較EC-1高,而E-Ca、nm23在EC-1中表達較EC-11高;從免疫組化的結(jié)果來看EC-11表現(xiàn)出更強的轉(zhuǎn)移潛能。兩瘤株均生長穩(wěn)定,傳代成功率高(100%),并凍存復蘇后仍能成瘤,成瘤率為69%;病理學檢查顯示保持原人食管鱗癌的特征,染色體分析顯示為人癌